Реферат.
Дипломная работа на тему: «Биохимические показатели крови человека при
сальмонеллезной интоксикации» содержит 46 страниц печатного текста,
таблиц, 8 рисунков, 59 использованных источников литературы, из них 10
иностранных.
Перечень ключевых слов: сальмонеллез, перекисное окисление липидов,
циркулирующие иммунные комплексы, каталаза, молекулы средней массы,
сывороточный альбумин, эндогенная интоксикация.
Объект исследования: сыворотка крови практически здоровых людей и
больных сальмонеллезом г. Пензы.
Практическое применение: в здравоохранении.
Список сокращений.
ПОЛ – перекисное окисление липидов;
ЦИК – циркулирующие иммунные комплексы;
ЧСА – человеческий сывороточный альбумин;
МДА – малоновый диальдегид;
ПЭГ – полиэтиленгликоль;
АОС – антиокислительная способность;
АТ – антитело;
АГ – антиген;
ИК – иммунный комплекс;
ЛПС – липополисахаридный комплекс;
МСМ – молекулы средней массы;
ТБК – тиобарбитуровая кислота;
ЭКА – эффективная концентрация альбумина;
ОКА – общая концентрация альбумина;
ТХУ – трихлоруксусная кислота;
ЦНС – центральная нервная система;
ц-АМФ – циклический аденозинмонофосфат;
АФК – активные формы кислорода;
LOOH, HOOH – гидроперекиси;
СОД – супероксиддисмутаза.
Содержание.
Введение………………………………………………………………..
Обзор литературы …………………………………………………
Биохимическая характеристика интоксикации при сальмонеллезной
инфекции…………………………..……..
Молекулярные механизмы развития эндогенной
интоксикации при сальмонеллезе……………………..…..
Показатели уровня эндогенной интоксикации
организма при сальмонеллезе……………………………….
Материалы и методы исследования………………………….
Материалы исследования…………………………………….
Методы исследования…………………………………………
Результаты и обсуждение………………………………….……
Определение показателей уровня интоксикации в
сыворотке крови практически здоровых людей……..
Определение показателей уровня интоксикации в
сыворотке крови больных сальмонеллезом………….…..
Список использованных источников……………………….…..
Выводы………………………………………………………………….
Приложения……………………………………………………………. 5-6
7-19
7-11
11-14
14-19
20-25
20
20-25
26-34
26-27
28-34
35-40
41
42-46
Введение
Успехи в борьбе с инфекционными заболеваниями в нашей стране
общепризнанны. Вместе с тем в инфектологии еще остаются проблемы,
имеющие серьезное социально-экономическое значение для всех стран мира.
К их числу относятся острые кишечные инфекционные заболевания [1].
Сальмонеллез – группа острых кишечных инфекционных болезней, вызываемых
бактериями рода Salmonella, характеризующихся значительным полиморфизмом
клинического течения, частым наличием интоксикации, лихорадки, признаков
поражения желудочно-кишечного тракта [2].
Крупные достижения отечественных и зарубежных исследователей,
установивших патогенетическое значение нарушения биологической регуляции
при острых кишечных инфекциях, дали новый импульс в изучении патогенеза
сальмонеллеза [3].
Иммунная система представляет собой сложную многокомпонентную систему из
быстроделящихся и покоящихся клеток. Она является высокочувствительной к
воздействию токсинов бактерий. Это приводит к нарушению
иммунорегуляторных процессов.
Наиболее информативными являются показатели состояний
прооксидантно-антиоксидантного равновесия, которое при усилении действия
на организм токсинов смещается в сторону активизации ПОЛ, уровня
холестерина, ЦИК, Ит, МСМ.
ПОЛ – это фундаментальный универсальный молекулярный механизм, лежащий в
основе устойчивости и адаптационных возможностей организма. В норме ПОЛ
обеспечивает условие для жизненно важных функций клетки, в случае же
интоксикации становится пусковым механизмом патобиохимических изменений
в организме человека.
Целью моей дипломной работы является изучение биохимических показателей
эндотоксикоза в динамике патологического процесса. В задачи исследования
входило:
Определение содержания МДА, уровня холестерина, ЦИК, Ит, МСМ и
активности каталазы в группе контроля, которую составили практически
здоровые люди.
Определение содержания МДА, уровня холестерина, ЦИК, Ит, МСМ и
активности каталазы у больных сальмонеллезом.
Исследование изменения изучаемых показателей у больных в зависимости от
степени тяжести заболевания.
Обзор литературы
Биохимическая характеристика интоксикации при сальмонеллезной инфекции
Сальмонеллезы принадлежат к числу инфекционных заболеваний, весьма
широко распространенных на всех континентах мира. Возбудителем
сальмонеллезов являются микроорганизмы, принадлежащие к роду Salmonella,
семейства кишечных Enterobacteriaceae.
Сальмонеллы – это мелкие бактерии вытянутой формы с закругленными
концами длиной от 1 до 3 и диаметром 0,5-0,8 нм [4].
Сальмонеллез встречается чаще у жителей городов, чем сел, что
связывается с лучшей регистрацией заболеваемости, наличием множественных
детских учреждений, широким употреблением пищевых полуфабрикатов.
Заболевание отмечается круглый год, но максимальное число регистрируется
в теплое время года, что объясняется благоприятными условиями
размножения сальмонелл в пищевых продуктах и реализации инфекции [5].
Таблица 1.1.1.
Статистические данные больных сальмонеллезом г. Пензы.
Год Количество больных
г. Пензы На 100 тыс. населения, % Кол-во больных Пензенской
области На 100 тыс. населения, %
1996 187 34,9 362 23,1
1997 140 26,1 316 20,3
1998 230 43,0 448 28,8
В возникновении сальмонеллеза ведущую роль играют живые бактерии, гибель
которых в организме больного сопровождается развитием эндотоксинемии.
Принято выделять два вида токсичных продуктов жизнедеятельности
микробов-экзотоксии и эндотоксии. К экзотоксинам отнесены токсичные
продукты жизнедеятельности бактерий, активно (при жизни) секретируемые в
окружающую среду, а к эндотоксинам – те ядовитые для макроорганизма
продукты жизнедеятельности, которые освобождаются только при лизисе
микробной клетки [6].
Кроме токсина палочка имеет ряд антигенов клеточной стенки. О-антиген
расположен на поверхности микробной клетки и представляет собой
фосфолипидно-полисахаридный комплекс, включающий 60 % полисахарида,
20-30 % липида и 3-4,5 % гексозамина. Н-антиген определяется жгутиками.
Поверхностные антигены клеточной стенки провоцируют типоспецифический
антительный ответ, а глубинные – видоспецифический [6,7].
При сальмонеллезе развитие и тяжесть симптомов обусловлены интоксикацией
и обезвоживанием. По мнению А.Ф. Билибина интоксикация – явление
сложное, сводящееся к изменению нервнорефлекторной деятельности и
гуморальной регуляции с обменными сдвигами. К.В. Бунин в основу синдрома
интоксикации ставит воздействие токсина на :
падение артериального давления, снижение сократительной способности
миокарда;
гормональную регуляцию водно-солевого обмена с изменениями биосинтеза
гормонов в коре надпочечников с угнетением процесса их метаболизма;
функцию почек (снижение клубочковой фильтрации, повышение канальцевой
реабсорбции воды, снижение концентрации очищения мочевины) [8].
Сальмонеллезная интоксикация возникает как результат патологии
первичного ответа на инфекционный агент вследствие значительных потерь
воды и электролитов с рвотой и жидким стулом. По мере увеличения
дефицита воды и электролитов на первый план выступают симптомы
обезвоживания и поражения ЦНС. Если процесс прогрессирует, обезвоживание
нарастает, появляются признаки недостаточности кровообращения, которые
при интоксикации имеют клинику шока. Частая рвота и понос – первые
признаки интоксикации [9].
Обязательным условием развития заболевания являются наличие большого
количества возбудителей и их токсинов, массовое проникновение антигенов
в кровь. Наибольшей токсичностью отличается липид А, вызывающий
следующие основные реакции: активацию лейкоцитов и макрофагов,
стимуляцию выброса эндогенного пирогена, антогониста глюкокортикоидов,
интерферона, интерлейкинов, подавление тканевого дыхания, активацию
системы комплемента, тромбоцитов, факторов свертывания крови другие
[10,11], [рис. 1.1.1].
Главной причиной развития шока при сальмонеллезе считается не
повреждающее действие самих микробов или их токсинов, а своеобразный
ответ организма на них. Под токсико-инфекционным шоком следует понимать
экстремальное состояние организма, наступающее в результате действия
токсичных субстанций возбудителей, патогенных иммунных комплексов на
органы и ткани организма, сопровождающееся острым нарушением метаболизма
в них [12].
Схематическое изображение липополисахаридов
стенок микробов.
Рис. 1.1.1.
С.А. Степанов с помощью аспирационной биопсии обнаружил в тонкой кишке
больных сальмонеллезом изменение эпителия, острое воспаление слизистой
оболочки, нарушение микроциркуляции и сосудистой проницаемости. К.Х.
Ходжаев в эксперименте на крысах показал, что сальмонеллезная инфекция
вызывает нарушение процесов тканевого дыхания и фосфорилирования.
Состояние поджелудочной железы изучено Белянской Т.А. В острый период
болезни отмечено снижение ферментативной активности панкреатического
сока – уровень трипсина был снижен в 71 % случаев, липазы в 55 %,
амилазы – в 66 %.
Таким образом эндотоксин вызывает активацию синтеза, преимущественно
протеолитических ферментов, задержку экструзии секретируемых проэнзимов,
что приводит к секреции и поступлению ферментов в лимфатическое и
кровеносное русло [13,14].
При сальмонеллезе развивается обезвоживание, обусловленное потерей
внеклеточной жидкости, а при тяжелом течении заболевания и части
клеточной. Дегидратация в большинстве случаев имеет изотонический
характер, сочетаясь с развитием сгущения крови, дефицитом электролитов,
метаболическим ацидозом в капиллярной и венозной крови [15], [рис.
1.1.2].
Молекулярные механизмы развития эндогенной
интоксикации при сальмонеллезе
Явления интоксикации вызывают заболевания, сопровождающиеся повышенным
распадом тканей, усиленными процессами катаболизма, недостаточностью
функции печени и почек, снижением процессов микроциркуляции [16].
В ответ на действие первичного патогена, которым являются эндотоксины,
сальмонелл, в организме развиваются типовые каскадные реакции, что лежит
в основе современной концепции СЭИ.
На Международном симпозиуме в Санкт-Петербурге (1994 г) было дано
определение этого синдрома как клинического синдрома с проявлением
симптомов интоксикации при патологических состояниях неоднородных по
этиологии и обуславливающих накопление в тканях и биологических
жидкостях организма продуктов патологического обмена веществ,
метаболитов, деструкции клеточных и тканевых структур, разрушения
белковых молекул [17,18].
Шано В.П. с соавторами подчеркивает, что токсическое влияние
липополисахаридной субстанции эндотоксина проявляется комплексом
нарушений, обусловленных повреждением как циркулирующих клеток в
кровотоке, так и эндотелиоцитов, эозинофилов, нейтрофилов, макрофагов,
следствием чего является выброс в кровоток ряда биологически активных
веществ – цитокинов, интерлейкинов. Главной точкой приложения
эндотоксина являются эндотелиальные клетки, активация их приводит к
высвобождению простациклина, выделению эластазы, токсических метаболитов
кислорода, факторов активации тромбоцитов и комплемента с высвобождением
терминального комплекса комплемента, брадикинина с последующим
формированием синдрома повышенной проницаемости капилляров. Это приводит
к тому, что в очаг воспаления начинают входить компоненты крови, прежде
всего фибриноген и тромбоциты. Фибрин способствует агрегации
тромбоцитов, полимеризации фибрина и – возникновению тромбов. Следствием
тромбоза являются нарушения микроциркуляции с последующей гипоксией, что
приводит к дальнейшим повреждениям клеток в очаге воспаления.
Метаболическим результатом этого является изменение аэробного
метаболизма клеток на анаэробный, повышенное продуцирование лактата и
протонов, снижение показателей рН [19].
Среди тканевых (клеточных) медиаторов воспаления важное место занимают
простагландины. Исходными продуктами для биосинтеза простагландинов
являются ненасыщенные жирные кислоты: линолевая, арахидоновая,
пентаноевая. Наибольшее значение имеет в организме арахидоновая кислота,
которая содержится в фосфолипидах клеточных мембран.
Простагландины вызывают сильное диуретическое и натрийуретическое
действие, оказывают разнообразное действие на желудочно-кишечный тракт.
Они могут стимулировать и тормозить сокращение и секреторную активность
тонкой кишки, тормозят секрецию соляной кислоты слизистой оболочки
желудка. Простагландины вызывают секрецию воды и электролитов в просвет
кишки, вызывая диарею, повышают концентрацию ц-АМФ в слизистой оболочке
тонкой кишки, влияют на прочность и упругость эритроцитарной мембраны
[20, 21, 22, 49].
Показатели уровня эндогенной интоксикации
организма при сальмонеллезе
) [23, 24].
Перекисное окисление является универсальным механизмом взаимодействия
кислорода со многими органическими субстратами, в том числе с липидами.
Внедрение кислорода в молекулы окисленного субстрата приводит к
образованию реакционно-способных промежуточных продуктов – свободных
радикалов, гидроперекисей, которые в дальнейшем вызывают повреждение
других классов соединений – белков, нуклеиновых кислот, углеводов (рис.
1.3.1).
Метаболизм супероксидного радикала в норме
и при патологии (Владимиров Ю.Я., 1998)
Рис. 1.3.1.
Накопленные к настоящему времени данные литературы позволяют сделать
вывод о том, что свободнорадикальное окисление липидов при
сальмонеллезной инфекции играет определенную патогенетическую роль [25,
50].
Установлено, что при развитии ПОЛ в биомембранах понижается содержание
легкоокисляемых полиненасыщенных жирных кислот и изменяются
физико-химические свойства: микровязкость, текучесть, мембранный
потенциал, полярность внутренних областей мембран. Таким образом,
изменяются транспортные свойства мембраны и активность ферментов [26].
Регуляция свободнорадикального окисления обеспечивается в клетке
системой антиоксидантной защиты. Так, накапливающаяся в процессе ПОЛ
перекись водорода обезвреживается с помощью каталазы, присутствующей во
всех тканях организма. Каталаза (КФ 1.11.1.6.) представляет собой
гемсодержащий фермент с молекулярной массой около 250000 Д,
локализованный в пероксисомах клеток [27].
Митохондриальная каталаза участвует в оксидазном пути окисления,
сопровождающемся запасанием энергии в виде АТФ. Блокирование транспорта
электронов в дыхательной цепи приводит к стимуляции пероксисомального
окисления. При потологиях, связанных с нарушением энергетических
процессов, каталаза пероксисом может выходить из них и участвовать в
окислении на мембранах эндоплазматического ретикулума [28, 53].
В работе Л.Б. Оконенко с соавторами о состоянии антиоксидантной системы
судили по активности СОД, глутатионпероксидазы и каталазы, анализ данных
выявил дефицит антиоксидантов [29, 30].
При инфекционном токсикозе в мембранах эритроцитов резко снижается
содержание общих фосфолипидов, но увеличивается количество НЭЖК и
лизофосфотидилхолина, что косвенно указывает на повышение активности
фосфолилаз, которые избирательно разрушают липиды мембран. Холестерин
подвергается как активному, так и пассивному обмену в мембранах
эритроцитов [29]. Фермент лецитинхолестеролацил трансфераза превращает
эфиры холестерина в свободный холестерин и тем самым регулирует уровень
свободного холестерина в плазме, что способствует проникновению его в
мембраны. Следовательно, инактивация этого фермента в результате
гипоксии при эндотоксикозе ведет к повышению уровня эфиров холестерина в
мембранах эритроцитов [31,32].
Наряду с уровнем МДА, активности каталазы и уровня холестерина для
диагностики заболевания и его прогноза имеют значение и другие
неспецифические показатели – ЦИК, Ит, МСМ.
Синтезирующиеся при формировании иммунитета специфические антитела
обладают способностью взаимодействовать с антигенами возбудителей и тем
самым вызывать нейтрализацию патогенных микробов и их токсинов. Эта
реакция сопровождается образованием иммунных комплексов антиген –
антитело [33, 34, 54, 55]. При патологических состояниях образование ИК
выходит из под контроля, в результате чего развивается та или иная
болезнь ИК [рис. 1.3.2.].
Патогенетические механизмы болезней иммунных
комплексов (Сура В.В., 1987)
Рис. 1.3.2.
В результате развития эндотоксемии при сальмонеллезе организм длительное
время контактирует с избытком АГ как экзогенного (компоненты микробных
клеток), так и эндогенного (компоненты разрушенных клеток самого
организма) происхождения. Вместе с тем наблюдается угнетение системы
комплемента, ответственного за лизис микробных клеток. В этих условиях
значительного избытка АГ и недостаточности выработки АТ может привести к
образованию ИК, которые способны откладываться в определенных тканях и
вызывать острые воспалительные реакции. При значительных отложениях
наблюдаются функциональные и морфологические повреждения органов и
тканей [35].
Связываясь с клеточной мембраной ЦИК вызывают выделение в окружающую
среду протеолитических ферментов и основных пептидов. Эти вещества
повреждают протеогликановые компоненты тканей, действуют на базальную
мембрану и вызывают некроз эндотелиальных клеток [36].
ЦИК наряду с продуктами ПОЛ вызывают нарушение проницаемости мембран,
вплоть до их разрыва, что в конечном итоге может привести к гибели
клетки. В результате появляются различные вещества пентидной природы. Из
них наибольший интерес представляют молекулы средней массы.
Являясь олигопептидами с молекулярной массой 300-5000 Дальтон, они
расцениваются как универсальный критерий эндогенной интоксикации и
влияют на ее уровень и прогноз [37, 38].
МСМ образуются в организме под воздействием повреждающих эндогенных или
экзогенных факторов различного генеза, являются промежуточными
продуктами протеолиза. [39, 57].
Пристальное внимание исследователей к МСМ объясняется высокой
биологической активностью их отдельных фракций, которые ингибируют
гликолиз, глюконеогенез, пентозный цикл, синтез гемоглабина, нуклеиновых
кислот, мембранный транспорт, дагоцитов, эритропоэз, микроциркуляцию,
обладают иммунодепрессивным, цитотоксическим, нейро- и психотропным
свойствами. Сейчас, квалификационная оценка степени тяжести состояния
больных при сальмонеллезе немыслима без определения МСМ [40].
Установлено, что значительная часть циркулирующих в крови СМ не только
растворена в плазме крови, но и связана с альбумином.
Человеческий сывороточный альбулин (ЧСА) – важнейший транспортный белок,
осуществляющий перенос эндогенных метаболитов и ксенобиотиков в плазме
крови, межклеточной жидкости, в лимфе.
Универсальность транспортной функции ЧСА обеспечивается его уникальной
способностью связывать лиганды различной химической природы. Интенсивная
лигандная нагрузка молекул альбулина приводит к изменению их структуры и
связывающей способности. Такие модификационные формы ЧСА обнаруживаются
при патологии [41].
О величине токсического действия вредных веществ можно судить по ЭКА,
которая снижается после того, как токсические вещества займут центры
связывания в молекуле альбулина, что приводит к снижению
детоксикационных свойств организма. Изучение свойств альбулина является
важным с точки зрения как диагностики, так и лечения [42].
Материалы и методы исследований
Материал исследований
Уровень интоксикации оценивался по изменениям в крови больных
эффективной и общей концентраций сывороточного альбулина, малонового
диальдегида, как одного из продуктов ПОЛ, уровня холестерина, ЦИК, МСМ и
активности каталазы.
Для всех исследований бралась сыворотка крови. Исследовано 30 больных
сальмонеллезом в возрасте от 17 до 46 лет. Для контроля набиралась
группа 51 человека разного пола в возрасте от 20 до 46 лет.
С.
Методы исследований
2.2.1. Определение МДА с тиобарбитуровой кислотой
(Конюхова В.С., 1989)
Об изменении интенсивности ПОЛ судим по изменению уровня вторичного
продукта ПОЛ – малонового диальдегида.
Метод основан на том, что при высокой температуре в кислой среде МДА
реагирует с 2-ТБК, образуя окрашенный розовый триметиновый комплекс с
максимумом поглощения при 535 им.
Ход работы: К 0,2 мл сыворотки крови добавить 0,2 мл дистиллированной
воды, 1 мл 0,6 % ТБК в ледяной уксусной кислоте. Кипятить 30 минут,
охладить и добавить 1 мл 5№ КОН и 2 мл изопропанола. Центрифугируют при
6000 об/мин 20 минут. Колориметрируют при 535 нм и 580 нм против
контроля, содержащего вместо плазмы воду.
(мкМоль/л), где Е – оптическое поглащение изопропилового экстракта;
106 – коэффициент пересчета оптической плотности.
Пример расчета: больной Максимов С., 19 лет
(мкМоль/л).
2.2.2. Определение активности каталазы
(Королюк М.А., 1988)
Метод основан на способности перекиси водорода образовывать с солями
молибдена стойкий окрашенный комплекс.
Ход определения: Реакция запускается добавлением 0,1 мл сыворотки крови
к 2 мл 0,03 % раствора перекиси водорода. В холостую пробу вместо
сыворотки вносят 0,1 мл дистиллированной воды. Реакцию останавливают
через 10 минут добавлением 1 мл 4% молибдата аммония. Интенсивность
окраски измеряют на спектрофотометре при длине волны 410 нм против
контрольной пробы, в которой вместо перекиси водорода вносят 2 мл воды.
(мкат/л), где
Е – активность каталазы в мкат/л;
А – оптическая плотность холостой и опытной проб;
V – объем вносимой пробы, 0,1 мл;
t – время инкубации, 600 сек;
.
За единицу активности каталазы принимают то количество фермента, которое
участвует в превращении 1 мкат перекиси водорода за 1 секунду при
заданных условиях. Расчет активности каталазы ведут на 1 л сыворотки
крови.
Пример расчета: больной Крайнов Т.В., 31 год.
(мкат/л)
2.2.3. Определение общего холестерина в сыворотке крови ферментативным
методом «Фотокол»
(Творогова М.Г., 1995)
Определение основано на сопряженных реакциях, которые катализирует
холестеринэстераза, холесериноксидаза и пероксидаза:
холестерин + Ж.К.;
холестинон + Н2О2;
Н2О + окрашенный продукт.
Концентрация образующегося в ходе реакции окрашенного продукта
пропорциональна концентрации холестерина в пробе.
Ход определения: Рабочий реагент обязательно вносить в пробирки после
проб, содержащих холестерин. Пробирки встряхнуть и инкубировать при t =
37oС. Через 10 минут после начала инкубации пробирки повторно встряхнуть
и инкубировать 20 минут при t = 37oС. Окрашенные пробы фотометрировать
при 500 нм в кювете с длиной оптического пути 5 мм или 10 мм
относительно холостой пробы. Окраска стабильна в течении двух часов при
комнатной температуре.
Концентрацию холестерина в исследуемых пробах рассчитать по формуле:
ммоль/л, где
ЕОП и ЕК – оптические плотности исследуемой пробы и пробы с
калибратором.
Норма: 3,62 – 5,2 ммоль/л.
2.2.4. Определение циркулирующих иммунных комплексов
в крови методом ПЭГ-теста (Гриневич Ю.А., 1988)
Метод основан на селективной преципитации комплексов АТ-АГ в 3,75 % ПЭГ
(полиэтиленгликоля) с последующим определением плотности преципитата.
Реактивы:
0,1 м боратный буфер (3,410 г борной кислоты, 4,275 г буры растворить в
1 л дистиллированной воды)
10 г полиэтиленгликоль – 6000 ед. растворить в 240 мл буфера.
при 450 нм.
– количество ЦИК в 100 мл сыворотки.
Норма: 54,24 + 2,03 усл. ед.
Пример расчета: больной Максимов С.И., 19 лет.
Количество ЦИК в 100 мл сыворотки:
усл. ед.
2.2.5. Определение уровня МСМ в крови (Габриэлен Н.И., 1984)
Метод основан на осаждении белков из исследуемой жидкости 10 % раствором
ТХУ с последующем центрифугированием и определением абсорбции света
супернатантом в 10 раз разведенным дистиллированной водой.
С. Центрифигируем 3000 об/мин в течение 30 минут. К 0,5 мл надосадочной
жидкости +4,5 мл дистиллированной воды. Измерение проводим на
спектрофотометре в УФ свете при 280 нм для определения ароматических
аминокислот и при длине волны 254 нм для определения нуклеотидов.
Уровень МСМ выражают в единицах, количественно равных показателям
экстинции.
2.2.6. Определение показателей «эффективная концентрация
альбумина» и «общая концентрация альбумина» в сыворотке крови человека
флуоресцентным методом
(Миллер Ю.И., 1994).
Принцип метода:
Метод основан на специфическом взаимодействии флуоресцентных
органических соединений с альбумином в сыворотке крови. В зависимости от
условий этого взаимодействия интенсивность флуоресценции красителя из
альбумина отражает различные свойства белка. Индекс ЭКА/ОКА не зависит
от числа молекул альбумина в пробе и характеризует физико-химические
свойства молекулы альбумина.
Состав набора:
Реактив I (4 ампулы по 5 мл). Предназначен для приготовления раствора
используемого при разбавлении сыворотки крови. Он содержит антикоагулянт
ЭДТА.
Реактив II (4 ампулы по 0,7 мл). Основным компонентом является
специальное флуоресцирующее соединение, интенсивность флуоресценции
которого в сыворотке крови пропорциональна концентрации сывороточного
альбумина.
Реактив III (4 ампулы по 0,7 мл). Взаимодействие реактивов №2 и №3 с
сывороткой позволяет определить ОКА.
Определение показателя ЭКА:
К 2,0 мл надосадочной жидкости добавить 0,025 мл реактива 2. Перемешать.
Измерить интенсивность флуоресценции при длине волны возбуждения 420 нм
и длине волны испускания 515 нм.
Определение показателя ОКА:
В ту же пробу добавить 0,025 мл реактива 3. Перемешать. Измерить
интенсивность флуоресценции. Нормальные величины показателя ЭКА лежат в
интервале нормальных значений ОКА от 40 г/л – 55 г/л.
Подготовка образцов крови к измерениям:
Буферный раствор: Содержимое ампулы с реактивом 1 перенести в 100 мл
дистиллированной воды. Перемешать. 0,025 мл сыворотки крови добавить в
пробирку, содержащую 5 мл раствора для разбавления крови. Для анализа
берут жидкость 2,0 мл полученного образца.
Используют специализированный анализатор АКЛ-0,1.
Результаты исследования и их обсуждение
Определение показателей уровня интоксикации
в сыворотке крови практически здоровых людей
Нами было произведено исследование биохимических показателей – МДА,
активность каталазы, уровень холестерина, ЦИК, МСМ, Ит в сыворотке крови
51 донора в возрасте от 20 до 46 лет. Сыворотка крови доноров была
получена на ОСПК (областная станция переливания крови) г. Пензы.
Полученные результаты биохимических анализов были подвергнуты
статистической обработке, согласно методам и приемам статистического
анализа.
По данным комитета экспертов Международной федерации клинической химии
по референтным величинам рекомендуется верхняя и нижняя границы нормы на
уровне М(1,96?, состояние предболезни М(2?, состояние острой формы М(3?.
Об уровне процессов ПОЛ судили по концентрации вторичного продукта МДА.
Содержание количества МДА составляет 3,61(0,07 мкМоль/л. Это значение
близко к данным, найденным в литературе (табл. 3.1.1). У 48 человек
значение содержания МДА входит в границы М(1,96?. У 3 человек (5 %)
содержание МДА соответствует значению М(2?, что соответствует состоянию
предболезни.
Активность каталазы у практически здоровых людей составила 16,7(0,15
мкат/л (табл. 3.1.1). При исследовании активности каталазы в группе
доноров отклонений за пределы М(1,96? мы не наблюдали.
Уровень холестерина, определяемый нами у практически здоровых людей
составил 4,45(0,68 ммоль/л (табл. 3.3.1.), показатели уложились в
границу референтной величины М(1,96?.
Содержание ЦИК, определяемое нами в сыворотке крови практически здоровых
людей составило 52,62(3,52 усл. ед. (табл. 3.1.1). 94 % людей по
показателям ЦИК входит в границы нормы, а 6% находятся в состоянии
предболезни.
Уровень МСМ у обследованных доноров в среднем составил 0,280(0,01 усл.
ед. Это значение близко к данным, найденным в литературе (табл. 3.1.1).
При исследовании МСМ отклонений за пределы М(1,96? мы не наблюдаем.
У практически здоровых людей определена детоксикационная нагрузка
сывороточного альбумина, т.е. определение общей и эффективной
концентрации альбумина. Токсичность по альбумину составляет 0,13(0,01
усл. ед. (табл. 3.1.1). Все значения токсичности по альбумину вошли в
границы М(1,96?.
Полученные нами данные не имели существенных отличий от значений этих
показателей, имеющихся в литературе в сравнении с приложением 2.
Таблица 3.1.1.
Содержание биохимических показателей в сыворотке крови практически
здоровых людей
Группа
обследованных n МДА
мкМоль/л Активность
каталазы
мкат/л ЦИК
усл. ед. МСМ
усл. ед. Ит
усл. ед. Холестерин
ммоль/л
Практически
здоровые 51 3,61(0,07 16,7(0,15 52,62(3,52 0,28(0,01 0,13(0,01 4,45(0,68
Определение показателей уровня интоксикации
в сыворотке крови больных сальмонеллезом
Сыворотка крови больных исследовалась на базе центра госсанэпиднадзора
г. Пензы. Исследования биохимических показателей велись в острую фазу
заболевания и в период ранней реконвалесценции. Обследовано нами 30
больных сальмонеллезом в возрасте от 17 до 46 лет, с целью установления
показателей, характеризующих эндотоксикоз: перекисное окисление липидов,
уровень холестерина, Ит по сывороточному альбумину, циркулирующих
иммунных комплексов, молекул средней массы и активности каталазы. Причем
биохимические показатели крови в разгар заболевания отличались от
показателей в период ранней реконвалесценции.
Таблица 3.2.1.
Биохимические показатели сыворотки крови
у больных сальмонеллезом
Группа
обследованных МДА
мкМоль/л Активность
каталазы
мКат/л Ит
усл. ед. ЦИК
усл. ед. МСМ
усл. ед. Холестерин ммоль/л
Контроль, n=51 (практически
здоровые) 3,61(0,07 16,7(0,15 0,13(0,01 52,62(3,52 0.280(0,01 4,45(0,68
Больные (острый период) n=30 7,19(0,2 13,09(0.16 0,29(0,01 100,63(4,04
0,550(0,02 6,54(0,07
Больные (ранняя
реконвалесценция) n=30 3,87(0,15 15,84(0,19 0,15(0,01 68,9(2,8
0,310(0,02 4,65(0,7
р?0,001 р?0,01 р?0,001 р?0,001 р?0,05 р?0,01
Так, в ходе исследования выявлено достоверное увеличение количества МДА
в сыворотке крови больных сальмонеллезом на 99 % по отношению к
контролю, т.е. возрастает в 2 раза. Данные наших исследований
подтверждаются сведениями Л.Б. Оконенко, Л.Д. Мартыненко и другими. По
данным этих авторов концентрация МДА при сальмонеллезе возрастает в
2-2,5 раза.
Как видно из таблицы (табл. 3.2.1), у больных наблюдается интенсификация
ПОЛ.
Под воздействием сальмонеллезного токсина происходит нарушение липидных
бислоев клеточных и субклеточных мембран. Накопление в крови первичных и
вторичных продуктов ПОЛ идет не в силу количественных изменений в
содержании фосфолипидов плазмы крови, а вследствие интенсификации их
свободнорадикального окисления. Результатом инициации ПОЛ становится
образование критических концентраций продуктов ПОЛ, которые токсичны для
организма. Известно, что повышение ПОЛ может приводить к нарушению
проницаемости мембран с последующей инактивацией
мембранно-ассоциированных ферментных систем, выходом лизосомальных
гидролаз в цитозоль, что вызывает повреждение ДНК т другие существенные
изменения в структуре и функциональном состоянии клетки [29, 43, 51,
52].
Установлено, что при ряде инфекционных заболеваний развивается
антиоксидантная недостаточность. Одновременно снижается актиность
ферментов антиоксидантной защиты, в частности каталазы [44].
По нашим наблюдениям, активность каталазы снизилась на 22 % в острый
период заболевания по отношению к контролю. В период ранней
реконвалесценции показатель активности каталазы приближается к контролю
(табл. 3.2.1).
Л.Б. Оконенко, Л.И. Волкова в своих работах отмечает угнетение
каталазной активности. В острый период заболевания происходит резкое
сокращение антиоксидантной обеспеченности организма [26, 29].
А.С. Волков указывает на то, что в процессе эндотоксикации
метаболические расстройства приводят к гиперлипидемии. Это
подтверждается данными наших наблюдений. Так, уровень холестерина в
сыворотке крови больных сальмонеллезом в среднем составил 6,54(0,07
ммоль/л, что на 46,9% больше контроля (табл. 3.2.1).
Таким образом, гиперхолестеринемия характеризует патологию обмена
липидов и липопротеидов [32,45].
В период ранней реконвалесуценции уровень холестерина приближается к
контролю [рис. 3.2.1].
Процентное соотношение показателей липидного обмена при эндотоксикозе,
вызванном сальмонеллезной инфекцией
Рис. 3.2.1.
Анализируя результаты проведенных исследований, мы установили, что
содержание ЦИК в плазме крови больных сальмонеллезом на 91 % больше, чем
в контроле [рис. 3.2.2]. Полученные данные согласуются с выводами
исследования И.А. Ильинского, Т.В. Лукинской и других. Повышенное
содержание ЦИК говорит о снижении антителообразования в присутствии
избытка антигенов. В подобной ситуации ЦИК индуцирует острое иммунное
воспаление, сопровождающееся повреждением эндотелия сосудов и почечных
клубочков, активацией кининовой системы, что ведет к более серьезным
метаболическим нарушениям [46, 47, 48].
Как правило, повышение уровня ЦИК обнаруживается уже в начальный период
болезни, на этом же уровне содержание их остается и в острую фазу.
Только в стадии реконвалесценции наблюдается понижение показателей
[табл. 3.2.1].
Процентное соотношение показателей эндотоксикоза (ЦИК, МСМ) в сыворотке
больных относительно контроля
Рис. 3.2.2.
При воспалении воздействие протеиназ на протеогликановые комплексы
тканей приводит к образованию пула токсических веществ со
среднемолекулярной массой (МСМ).
У обследованных нами больных сальмонеллезом уровень МСМ на 96 % выше по
сравнению с контролем (рис. 3.2.2). По нашим данным содержание МСМ при
сальмонеллезе повысилось в 1,9 раза, что согласуется с данными
исследований Б.С. Нагаева и М.И. Габриловича. В наших исследованиях
уровень МСМ повышается в разгар заболевания [табл. 3.2.1].
Как указывают многие авторы повышение уровня МСМ является
неблагоприятным признаком. Объясняется это тем, что отдельные фракции
МСМ обладают различной биологической активностью: ингибируют
эритропоэз, угнетают синтез гемоглобина, ДНК, глюконеогенез, изменяют
проницаемость мембран, нарушают тканевое дыхание и микроциркуляцию.
Поэтому, среди широкого круга метаболитов, оказывающих токсическое
действие, интегральным показателем эндотоксикоза считают уровень МСМ
[39, 40, 48, 56].
Важное звено в системе детоксикации организама представляет альбулин,
поскольку он переносит к гепатоцитам эндогенные метаболиты.
Эффективная концентрация альбулина при сальмонеллезе снижается, т.к.
токсические вещества занимают центры связания в молекуле альбулина.
Следовательно, связывающая способность альбулина может служить критерием
общей интоксикации организма. Загруженность альбулина метаболитами дает
информацию об эффективности функционирования печени и почек – основных
детоксирующих органов человека [41, 42].
В результате наших исследований ЭКА в острый период заболевания
составила 42,3(2,87 (г/л), в период ранней реконвалесценции 43(2,16
(г/л). Содержание ОКА в острую фазу заболевания составляет 54,5(3,52
(г/л), в период ранней реконвалесценции 50(3,8 (г/л) [прилож. 6,7].
Снижение ЭКА ведет к повышению коэффициента токсичности. Было
установлено, что индекс токсичности у больных сальмонеллезом возрастает
на 123 % по сравнению с контролем [рис. 3.2.3]. По нашим данным уровень
Ит в острую фазу заболевания повысился в 2,3 раза [табл. 3.2.1].
На основании проведенных исследований можно сделать следующее
заключение: у больных сальмонеллезом происходят интенсификация ПОЛ и
угнетение иммунитета, снижение антиоксидантной защиты и детоксикационной
способности организма.
Определение индекса токсичности по сывороточному
альбулину в сыворотке крови больных
сальмонеллезом
Рис. 3.2.3.
Таким образом, в наших исследованиях мы установили, что при
сальмонеллезе уровень показателей ПОЛ, уровень холестерина, Ит, ЦИК, МСМ
повышается, что согласуется с данными, имеющимися в литературе [рис.
3.2.4]. В исследуемой нами группе больных наиболее информативными
показателями являются МДА, Ит, МСМ.
Выводы Список литературы
Покровский В.И., Килессо А.В., Ющук Н.Д. Сальмонеллезы, результаты и
перспективы их научных исследований // Советская медицина. – 1994. – №5.
– С. 3-8.
Будагян Ф.Е. Пищевые токсикозы, токсиноинфекции, их профилактика. – М.:
Медицина, 1989. – 207 с.
Покровский В.И. Острые кишечные инфекции // Советская медицина, 1989. –
№5. – С. 6-13.
Тимаков В.Д., Петровская В.Г. Биологические и генетические
характеристики рода salmonella. – М.: Медицина, 1990. – 293с.
Бунин К.В. Пищевые токсикоинфекции. – М.: Медицина, 1989. – 302 с.
Бойченко М.Н. Сальмонеллез: Распространение возбудителя в организме //
Журнал микробиологии и эпидемиологии, 1991. – №5. – С. 9-13.
Мельников В.И., Гимранов М.Г. Ферменты патогенности и токсины бактерий.
– М.: Медицина, 1995. – 252с.
Бунин К.В., Бродов Л.Е. О возможности возникновения
инфекционно-токсического шока при сальмонеллезе // Терапевтический
архив, 1995. – №8. – С. 27-32.
Пак С.Г., Гурьянов М.Х., Пальцев М.А. Сальмонеллез. – М.: Медицина,
1990. – 304с.
Кац Л.Н., Зигангирова Н.А. Жирнокислотный состав ЛПС бактерий рода
salmonella // Журнал микробиологии и эпидемиологии. – 1990. – №7. – С.
35-38.
Вертиев Ю.В. Бактериальные токсины: Биологическая сущность и
происхождение // Журнал микробиологии и эпидемиологии. – 1996. – №3. –
С. 43-46.
Mannel D.N., More R.N. Endotoxinin – duced tumor cytotoxic factor //Jn.
Microbiology. – 1990. – Р. 141.
Ющук Н.Д., Тендетник Ю.М. Патогенез сальмонеллезов// Советская медицина.
– 1991. – №8. – С. 77-82.
Бунин К.В. Основы патогенетической иммунологии инфекционных болезней//
Клиническая медицина. – 1990. – №3. – С.9-13.
Малов В.А., Пак С.Г. Медико-биологические аспекты проблемы интоксикации
в инфекционной патологии // Терапевтический архив. – №1. – 1992. – С.
7-12.
Аркамов В.А., Межирова И.М., Ткачук З. А. Патофизиологические аспекты
эндогенной интоксикации при кишечной инфекции // Анестезиология и
реаниматология. – 1990. – №5. – С. 28-32.
Кузнецов Н.Н., Девайкин Е.В., Егоров В.М. Синдром эндогенной
интоксикации при критических состояниях организма, новые диагностические
и прогностические возможности //Анестезиология и реаниматология. – 1996.
– №6. – С. 21-27.
Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вестник Российской
академии медицинских наук. – 1998. – №7. – С. 43-57.
Шано В.П., Гюльмамедов Ф.И., Нестеренко А.Н. Варианты лечения
критических состояний с учетом патогенеза SIRS-синдрома системного
воспалительного ответа //Анестезиология и реаниматология. – 1997. – №6.
– С. 48-52.
Юркив В.А. Эндогенные простагландины и их роль в механизме развития
диареи //Простагландины в эксперименте и клинике. – 1990. – №5. – С.
176-177.
Марков Х.М. Современное учение о простагландинах //Патофизиология. –
1990. – №5 – С. 13-15.
Шубич М.Г., Авдеева М.Г. Медиаторные аспекты воспалительного процесса
//Архив патологии. – 1997. – №2 – С. 3-8.
Ерин А.И. Механизмы ПОЛ. Запуск и регуляция //Бюллетень
экспериментальной биологии и медицины. – 1994. – Т.118. -№10. – С.
343-348.
Мамонтова Н.С. Инициирование ПОЛ в сыворотке крови //Клиническая
медицина. – 1992. – №6. – С. 37-40.
Бурлакова Е.Б., Храпова И.Г. Перекисное окисление липидов мембран и
природные антиоксиданты // Успехи химии. – 1990. – №9. – С. 1540-1557.
Волкова Л.И., Бондаренко М.И. Перекисное окисление липидов и механизм
антиоксидантного действия // Врачебное дело. – 1991. – №12. – С. 35-38.
Бенина Н.Ф., Чеганова М.И. Активность окислительно-восстановительных
ферментов у больных с хроническими воспалительными заболеваниями //
Клиническая медицина. – 1989. – №1. – С.17-22.
Ахмедов Д.Р. Клинико-патогенетическое значение антиоксидантной системы
при инфекционных заболеваниях // Иммунология. – 1994. – №2. – С. 25-27.
Оконенко Л.Б. Перекисное окисление липидов при сальмонеллезе // Журнал
микробиологии и эпидемиологии. – 1994. – №6. – С. 55-58.
Махмудов О.С., Исматуллаев О.Ш. Клиническая эффективность применения
витамина Е в лечении сальмонеллеза // Клиническая диагностика. – 1990. –
№6. – С.93-95.
Титов В.Н., Творогова М.Г., Никитин С.В. Холестерин сыворотки крови:
методические аспекты и диагностическое значение // Клиническая
диагностика. – 1992. – №3. – С.45-51.
Курашвили Л.В., Волков А.С. Прогностическая значимость определения
холестерина во фракции липопротеидов высокой плотности // Клиническая
диагностика. – 1993. – №3. – С.5-8.
Лященко Ю.И., Трихлеб В.И. Циркулирующие иммунные комплексы при
инфекционных заболеваниях // Советская медицина. – 1991. – №1. – С.
27-29.
Вельбри А.Л. Одновременная оценка уровня иммунных комплексов и
иммуноглобулинов для характеристики патологического процесса //
Лабораторное дело. – 1990. – №5. – С. 7-18.
Виноградова Т.В., Капелько М.А. Взаимосвязь между уровнем ЦИК и
функциональным состоянием фагоцитирующей системы // Иммунология. – 1991.
– №5. – С. 63-66.
Сура В.В., Масонов Е.Л., Борисов Н.А. Клинико-патогенетические
закономерности развития болезней иммунных комплексов // Терапевтический
архив. – 1987. – №12. – С. 3-10.
Владыка А.С., Левицкий Э.Р., Поддубная Л.П. Средние молекулы и проблема
эндогенной интоксикации при критических состояниях различной этиологии
// Анестезиология и реаниматология. – 1990. – №1. – С. 37-41.
Николайчик В.В., Кирковский В.В., Лобачева Г.А. «Средние молекулы» –
образование и способы определения // Лабораторное дело. – 1989. – №8. –
С. 31-33.
Киреев С.С., Багмут Т.А., Курочкин М.Ю. Определение тяжести
эндотоскикоза при критических состояниях организма // Педиатрия. – 1990.
– №6. – С.107-109.
Владыка А.С., Беляков И.А. Диагностическое значение уровня МСМ в крови
при оценке тяжести эндотоксинемии // Вестник хирургии. – 1989. – №8. –
С. 126-129.
Иванов А.И., Сарнацкая В.В., Короленко Е.А. Модификация лигандной
нагрузки и структуры сывороточного альбулина человека при различных
методах выделения // Биохимия. – 1996. – т. 61. – вып.№5. – С. 903-912.
Миллер Ю.И., Добрецов Г.Е. Молекулярные основы флюоресцентного метода
определения связывающей емкости альбулина сыворотки крови // Биохимия. –
1994. – №5. – С.20-28.
Мартыненко Л.Д., Шепелев А.П. Перекисное окисление липидов при
экспериментальной сальмонеллезной инфекции // Журнал Микробиологии и
эпидемиологии. – 1990. – №4.– С.7-10.
Чудинова В.В., Алексеев С.М. Перекисное окисление липидов и механизм
антиоксидантного действия // Биоорганическая химия. – 1994. – №10. – т.
20. – С. 1029-1047.
Творогова М.Г. Степень достоверности однократного определения
холестерина (обзор литературы) // Клиническая диагностика. – 1997. – №1.
– С. 4-5.
Ильинский И.А., Лукинская Т.В. Циркулирующие иммунные комплексы при
сальмонеллезе // Иммунология. -–1994. – №4. – С. 105-108.
Фролов В.М., Ющук И.Д. Иммунный статус больных сальмонеллезом //
Иммунология. – 1992. – №10. – С. 108-112.
Нагаев Б.С., Габрилович М.И., Кимова И.А. Содержание среднемолекулярных
пептидов в плазме крови больных сальмонеллезом // Инфекционные болезни.
– 1996. – №6. – С. 12-17.
Field M., Musch M.W. Role of prostaglandins in regulation of
instestional elektrolyte transport // Prostaglandins. – 1991. – vol.21.
– P. 73-80.
Jaya P.S., Agstine J., Menon V.P. Roll of lipid peroxides, glutathione
and antiperoxidative erzymes in alcohd and drus toxicity // Exp. Biol.
Jndian J. – 1993. – №5. – P. 453-459.
Praper H.H., Sgvires E.J., Agarwal S., Hadley M. A comporative evalution
of thiobarbituric acid methods for the determination of malondialdehyde
in biological materials // Free. Radic. Biol. Med. – 1993. – №4. – P.
353-363.
Anderson D., Phillips B.T. Schemere P. The effect of variovus
antioxidants and other modifying agents on oxygen radical generated DNA
famage in human lymphucytes in the comet assay // Environ. and Mol.
Mutagenes. – 1994. – 23. Suppl n.23. – P. 2-8.
Desharer David, Wood Gwendolyn E., Friedman Richard L. Mollecular
characterirution of catalase from Bortetella pertussis: Jdentification
of the Kat A promot er in an upstream insertion seguence // Mol.
Microbiol. – 1994. – №1. – P. 123-130.
Cheigton W.D., Zambent P.H., Mischer P.A. Circulationg immune complexes
in infections diseases // Jmmunol. – 1993. – v.111. – P. 1219-1227.
Webster David M., Rees Anthohy R. Antibody – antigen interactions //
Curr. Opinion struct. Biol. – 1994. – №1. – P. 123-129.
Schimuzu T., Kondo R. A method for the detection of Medium – sized
molecules //Anch. Biochem. – 1991. – vol. 206. – P. 271-276.
Bannet E.V. Chia D., Restivo C. et al. – peptides of the “middle
molecules” group // Analyt. Biochem. – 1994. – vol. 86. – P.271-278.
ПРИЛОЖЕНИЕ
Приложение 1.
Биохимические показатели крови
практически здоровых людей, n=51.
№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа МДА (мкМоль/л) ЦИК
(усл. ед.) Уровень холестерина
ммоль/л Активность каталазы МСМ
(усл. ед.)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 3,59 30 3,47 19,4 0,358
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 3,62 30 4,95 17,2 0,225
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 2,18 45 3,54 16,1 0,352
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 3,6 60 5,188 16,8 0,214
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 3,48 100 4,90 17,1 0,287
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 4,6 69 3,915 15,8 0,254
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 3,59 40 4,056 16,6 0,269
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 3,47 30 5,047 15,7 0,362
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 4,65 76 5,141 16,2 0,261
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 3,53 34 5,188 16,9 0,253
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 4,00 99 3,77 17,4 0,357
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 3,45 70 3,33 18,2 0,167
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 3,48 35 3,49 16,3 0,253
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 3,54 61 3,40 14,5 0,256
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 4,47 30 4,24 16,1 0,268
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 3,59 34 3,91 16,4 0,377
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 4,35 110 5,14 17,3 0,245
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 3,48 31 5,33 17,8 0,280
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 3,60 60 4,24 18,1 0,218
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 3,54 54 5,09 17,6 0,382
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 4,0 33 4,86 16,7 0,355
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 3,77 45 3,77 16,3 0,232
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 3,61 120 3,33 15,8 0,274
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 3,44 100 3,96 14,9 0,286
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 2,93 69 5,14 16,8 0,253
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 3,61 70 5,19 16,6 0,268
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 3,53 43 5,05 17,3 0,351
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 3,61 27 4,9 17,8 0,194
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 3,75 30 4,95 14,5 0,309
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 3,48 60 3,77 16,2 0,214
31 Ш. А. Л. 30 М 17.02.99 3,59 58 4,48 17,2 0,232
32 Г. А. К. 41 Ж 17.02.99 4,21 41 3,91 16,8 0,305
33 Ч. И. В. 24 М 16.02.99 3,99 30 5,05 16,3 0,265
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
34 С. О. Ю. 30 М 16.02.99. 3,57 35 3,58 16,9 0,239
35 С. С. М. 27 М 16.02.99. 3,02 46 3,39 15,7 0,248
36 М. С. В. 29 Ж 9.02.99. 2,50 38 5,14 14,3 0,372
37 Р. Т. А. 28 Ж 9.02.99. 3,88 33 3,77 16,2 0,245
38 С. С. В. 28 Ж 16.04.98. 2,61 54 4,24 16,8 0,261
39 С. В. В. 32 М 16.04.98. 3,14 37 5,38 17,1 0,379
40 Р. Т. В. 23 М 15.05.98. 3,99 19 4,95 18,3 0,358
41 О. А. Е. 25 М 15.05.98. 3,24 75 5,05 16,9 0,251
42 А. В. Е. 33 М 18.05.98. 3,88 28 4,56 17,5 0,275
43 Б. В. С. 44 М 18.05.98. 4,26 110 3,33 15,6 0,213
44 С. В. И. 30 Ж 19.02.99. 4,09 46 4,81 14,8 0,307
45 К. Ю. И. 46 М 19.02.99. 3,77 48 5,03 16,3 0,264
46 В. Ю. И. 37 М 27.03.98. 3,81 43 4,95 16,7 0,280
47 К. Е. И. 32 М 27.03.98. 3,54 44 5,33 16,9 0,232
48 Ж. Ю. С. 30 М 5.04.98. 4,04 85 3,77 17,3 0,218
49 П. В. А. 31 Ж 5.04.98. 3,15 23 4,24 18,8 0,381
50 Б. А. И. 31 М 13.04.98 3,45 37 5,05 16,8 0,239
51 Л. Т. Ю. 42 М 9.02.99. 3,04 59 5,33
? 3,61 52,62 4,45 16,7 0,280
m 0,07 3,52 0,68 0,15 0,01
? 0,48 25,17 0,09 1,04 0,06
Приложение 2
Содержание биохимических показателей в сыворотке крови практически
здоровых людей по данным литературы
Группа
обследованных n МДА
мкМоль/л Активность
каталазы
мкат/л ЦИК
усл. ед. МСМ
усл. ед. Холестерин
ммоль/л
Мартыненко Л.Д., 1990 31
4,36(0,27
Оконенко Л.Б., 1994 34
16,3(0,3
Куликов И.Н., 1996 40
54,2(3,2
Нагаев Б.С., 1996 70
0,31(0,02
Творогова М.Г. 1995 40
4,62(0,31
Приложение 3
Биохимические показатели крови практически здоровых людей, n=51
№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа ЭКА (г/л) ОКА
(г/л) ОКА
(%) Ит
(усл. ед.)
1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 43 49 88 0,13
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 46 53 87 0,15
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 34 41 84 0,16
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 38 44 86 0,15
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 48 56 86 0,16
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 47 52 90 0,10
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 46 53 87 0,15
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 48 57 84 0,18
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 44 49 90 0,11
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 42 49 86 0,17
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 46 51 90 0,11
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 36 50 89 0,11
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 47 54 87 0,14
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 47 52 90 0,10
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 45 50 90 0,11
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 35 41 85 0,17
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 42 46 91 0,09
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 38 44 86 0,15
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 47 52 90 0,10
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 47 54 87 0,14
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 34 41 84 0,16
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 46 53 87 0,15
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 39 44 88 0,12
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 51 55 93 0,07
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 43 48 89 0,11
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 47 54 87 0,14
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 38 44 86 0,15
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 49 55 89 0,12
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 36 40 89 0,11
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 38 44 86 0,15
31 Ш. А. Л. 30 М 17.02.99 40 43 93 0,08
32 Г. А. К. 41 Ж 17.02.99 42 46 91 0,09
33 Ч. И. В. 24 М 16.02.99 48 56 86 0,16
1 2 3 4 5 6 7 8 9
34 С. О. Ю. 30 М 16.02.99. 49 55 89 0,12
35 С. С. М. 27 М 16.02.99. 47 52 90 0,10
36 М. С. В. 29 Ж 9.02.99. 45 50 90 0,11
37 Р. Т. А. 28 Ж 9.02.99. 39 44 88 0,13
38 С. С. В. 28 Ж 16.04.98. 43 48 89 0,11
39 С. В. В. 32 М 16.04.98. 36 40 90 0,11
40 Р. Т. В. 23 М 15.05.98. 38 44 86 0,15
41 О. А. Е. 25 М 15.05.98. 35 41 85 0,17
42 А. В. Е. 33 М 18.05.98. 48 53 91 0,10
43 Б. В. С. 44 М 18.05.98. 37 44 84 0,18
44 С. В. И. 30 Ж 19.02.99. 45 50 90 0,11
45 К. Ю. И. 46 М 19.02.99. 47 54 87 0,14
46 В. Ю. И. 37 М 27.03.98. 44 51 86 0,16
47 К. Е. И. 32 М 27.03.98. 42 46 91 0,09
48 Ж. Ю. С. 30 М 5.04.98. 48 56 86 0,16
49 П. В. А. 31 Ж 5.04.98. 47 53 89 0,13
50 Б. А. И. 31 М 13.04.98 36 40 89 0,11
51 Л. Т. Ю. 42 М 9.02.99. 43 48 89 0,11
? 43 48,8 88 0,13
m
0,01
?
0,03
Приложение 4
Биохимические показатели крови
больных сальмонеллезом в острый период, n=30.
№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа № истории болезни МДА (мкМоль/л)
ЦИК
(усл. ед.) Уровень
холестерина
ммоль/л Активность каталазы МСМ
(усл. ед.)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1 М. А. М. 32 М 14.02.98. 160А02.8 5,84 74 5,37 13,6 0,611
2 Л. В. И. 37 М 14.02.98. 230А02.08 6,02 133 8,91 12,7 0,537
3 С. О. Е. 29 М 9.02.99. 410А02.1 7,18 96 5,74 13,8 0,683
4 Б. В. И. 46 Ж 9.02.99. 182А02.1 5,93 111 5,68 13,1 0,700
5 Х. В. В. 28 Ж 11.07.99. 523А02.0 8,13 120 4,75 14,4 0,570
6 С. Н. Е. 19 Ж 12.10.98. 728А02.8 9,34 82 7,03 11,8 0,700
7 М. О. И. 24 Ж 11.10.98. 615А02.8 6,59 140 9,85 10,9 0,782
8 К. Г. А. 32 М 3.03.98. 363А02.8 7,77 68 7,3 13,5 0,604
9 Д. И. Е. 39 М 3.03.98. 290А02.8 5,96 97 5,72 13,0 0,543
10 Е. Т. А. 17 Ж 10.02.98. 490А02.1 8,93 88 4,12 12,7 0,529
11 Р. О. А. 37 Ж 10.02.98. 517А02.1 7,13 105 8,91 13,5 0,690
12 К. С. И. 39 М 27.02.98. 560А02.8 6,60 92 5,7 13,1 0,581
13 Ш. Г. В. 25 Ж 13.03.98. 393А02.8 7,25 148 4,82 13,6 0,742
14 Б. И. Р. 41 М 13.03.98. 102А02.8 8,18 105 6,84 12,8 0,458
15 П. О. К. 33 Ж 4.07.98. 280А02.8 9,05 76 4,72 12,4 0,617
16 К. И. И. 29 Ж 4.07.98. 432А02.1 5,94 115 9,67 13,7 0,610
17 Т. С. И. 31 Ж 4.07.98. 630А02.0 6,64 73 5,9 13,2 0,623
18 С. И. В. 47 М 28.09.98. 216А02.0 7,81 108 5,06 13,6 0,542
19 К. И. Б. 42 Ж 28.09.98. 390А02.8 8,20 139 4,84 11,7 0,413
20 П. О. А. 53 М 15.02.99. 575А02.8 6,95 132 6,45 10,9 0,562
21 С. И. П. 25 М 15.02.99. 721А02.8 7,17 99 5,6 12,8 0,717
22 Е. Т. С. 24 Ж 17.02.99. 470А02.8 5,27 114 8,48 13,6 0,657
23 З. О. Ю. 36 М 17.02.99. 370А02.0 7,53 83 5,52 14,2 0,614
24 М. Л. А. 41 М 6.10.98. 182А02.0 8,41 92 7,73 13,3 0,534
25 Д. С. К. 22 Ж 6.10.98. 652А02.8 6,12 100 7,73 13,8 0,586
26 К. С. Д. 18 Ж 11.10.98. 713А02.8 7,03 86 10,15 12,9 0,570
27 Е. А. В. 43 М 28.08.98. 760А02.8 5,90 77 6,8 13,7 0,681
28 М. О. Р. 33 М 28.08.98. 535А02.8 7,77 69 6,24 13,6 0,649
29 П. З. Л. 30 Ж 7.12.98. 862А02.0 6,78 102 5,72 13,7 0,740
30 Е. В. В. 31 Ж 7.12.98. 718А02.8 8,27 95 3,89 12,9 0,531
? 7,19 100,63 6,54 13,09 0,550
m 0,196 4,04 0,07 0,16 0,02
? 1,07 22,138 0,01 0,85 0,11
Приложение 5
Биохимические показатели крови
больных сальмонеллезом в стадии ремиссии, n=30.
№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа № истории болезни МДА (мкМоль/л)
ЦИК
(усл. ед.) Уровень
холестерина
ммоль/л Активность каталазы МСМ
(усл. ед.)
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1 М. А. М. 32 М 14.02.98. 160А02.8 3,84 54 3,77 15,8 0,225
2 Л. В. И. 37 М 14.02.98. 230А02.8 4,02 48 4,95 15,6 0,287
3 С. О. Е. 29 М 9.02.99 410А02.1 5,18 35 5,14 14,5 0,354
4 Б. В. И. 46 Ж 9.02.99. 182А02.1 3,03 96 4,24 16,1 0,268
5 Х. В. В. 28 Ж 11.07.98. 523А02.0 4,15 77 5,19 16,4 0,256
6 С. И. Е. 19 Ж 12.10.98. 728А02.8 5,96 68 3,96 15,7 0,358
7 М. О. И. 24 Ж 11.10.98. 615А02.8 3,19 58 3,39 14,9 0,280
8 К. Г. А. 32 М 3.03.98. 363А02.8 4,17 60 5,05 14,5 0,332
9 Д. И. Е. 39 М 3.03.98. 290А02.8 2,98 56 5,14 16,2 0,253
10 Е. Т. А. 17 Ж 3.03.98. 490А02.1 5,63 73 4,95 17,3 0,209
11 Р. О. А. 37 Ж 10.02.98 517А02.1 3,65 100 5,24 15,8 0,209
12 К. С. И. 39 М 10.02.98. 560А02.8 3,53 83 5,09 14,3 0,214
13 Ш. Г. В. 25 Ж 27.02.98. 393А02.8 4,12 69 3,77 17,6 0,272
14 Б. И. Р. 41 М 13.03.98. 102А02.8 3,68 75 4,24 17,1 0,353
15 П. О. К. 33 Ж 13.03.98. 280А02.8 4,16 81 3,77 15,3 0,386
16 К. И. И. 29 Ж 4.07.98. 432А02.1 2,93 63 5,05 17,7 0,232
17 Г. С. И. 31 Ж 4.07.98. 630А02.0 3,57 77 3,75 16,8 0,305
18 С. И. В. 47 М 4.07.98. 216А02.8 3,69 68 4,24 16,4 0,265
19 К. И. Б. 42 Ж 28.09.98. 390А02.8 4,12 100 3,92 15,9 0,413
20 П. О. А. 53 М 28.90.98. 575А02.8 3,95 64 4,16 16,8 0,294
21 С. И. П. 25 М 15.02.99. 721А02.8 3,17 73 5,33 14,3 0,562
22 Е. Т. С. 24 Ж 15.02.99. 470А02.8 2,50 72 4,81 14,9 0,531
23 З. О. Ю. 36 М 17.02.99 370А02.0 4,53 59 4,24 15,6 0,309
24 М. Л. А. 41 М 17.02.99. 182А02.0 4,41 43 5,02 16,3 0,265
25 Д. С. К. 22 Ж 6.10.98. 652А02.8 3,12 48 3,33 16,9 0,272
26 К. С. Д. 18 Ж 6.10.98. 713А02.8 3,03 66 5,91 15,7 0,239
27 Е. А. В. 43 М 11.10.98. 760А02.8 2,90 72 3,89 15,9 0,245
28 М. О. Р. 33 М 28.08.98. 535А02.8 4,77 73 4,74 16,2 0,179
29 П. З. Л. 30 Ж 7.12.98. 862А02.0 3,78 80 5,58 14,7 0,524
30 Е. В. В. 31 Ж 7.12.98. 718А02.8 4,27 77 3,68 13,9 0,355
? 3,87 68,9 4,65 15,84 0,31
m 0,15 2,8 0,7 0,19 0,02
? 0,81 15,41 0,09 1,02 0,1
Приложение 6
Биохимические показатели крови больных сальмонеллезом в острый период,
n=30
№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа ЭКА (г/л) ОКА
(г/л) ОКА
(%) Ит
(усл. ед.)
1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 42 54 78 0,28
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 42 56 75 0,33
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 44 59 74 0,35
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 38 49 77 0,29
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 47 59 79 0,25
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 42 57 74 0,37
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 42 55 76 0,31
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 43 54 80 0,26
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 44 59 75 0,35
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 45 55 82 0,22
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 44 59 75 0,34
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 40 51 78 0,27
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 42 58 72 0,38
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 42 56 75 0,34
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 45 54 83 0,21
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 38 55 69 0,43
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 38 49 78 0,29
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 44 55 80 0,25
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 42 57 74 0,36
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 43 57 75 0,32
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 35 41 85 0,17
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 47 58 81 0,24
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 40 51 78 0,27
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 43 50 86 0,16
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 42 56 75 0,33
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 43 54 80 0,26
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 42 58 72 0,38
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 48 57 84 0,19
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 45 54 83 0,21
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 38 49 78 0,29
? 42,3 54,5 77,7 0,29
m 2,87 3,52
0,01
? 17,6 24,12
0,07
Приложение 7
Биохимические показатели крови больных сальмонеллезом в стадии ремиссии,
n=30
№ п/п Ф. И. О. Возраст Пол Дата анализа ЭКА (г/л) ОКА
(г/л) ОКА
(%) Ит
(усл. ед.)
1 2 3 4 5 6 7 8 9
1 К. В. И. 35 Ж 5.02.98. 46 53 86 0,15
2 К. Б. А. 39 М 5.02.98. 34 41 84 0,16
3 У. С. Б. 29 М 15.02.98. 38 44 86 0,15
4 И. И. И. 31 Ж 17.02.98. 47 51 84 0,18
5 К. В. Л. 34 М 17.02.98. 42 51 86 0,16
6 М. В. В. 40 М 17.02.98. 36 40 89 0,11
7 С. П. Б. 40 М 25.02.98. 47 51 84 0,18
8 Л. Е. В. 32 М 25.02.98. 35 41 85 0,17
9 Г. Т. Ю. 28 Ж 15.03.98. 36 40 85 0,11
10 А. И. А. 28 Ж 16.03.98. 46 53 86 0,15
11 Л. Л. Я. 40 Ж 16.03.98. 39 44 88 0,12
12 С. Б. И. 46 Ж 19.03.98. 54 63 86 0,16
13 С. И. В. 28 Ж 16.04.98. 36 50 89 0,11
14 М. А. И. 31 М 16.04.98. 36 42 86 0,17
15 Х. А. И. 37 М 22.04.98. 44 52 85 0,18
16 К. И. П. 30 М 22.04.98. 48 56 86 0,16
17 Р. И. И. 33 М 22.04.98. 43 48 90 0,12
18 И. И. А. 29 Ж 27.04.98. 42 47 89 0,12
19 И. В. А. 40 М 27.04.98. 49 56 88 0,14
20 М. И. В. 36 Ж 10.05.98. 35 41 85 0,17
21 С. В. Г. 32 М 10.05.98. 47 52 90 0,10
22 З. О. А. 32 М 12.05.98. 43 49 88 0,13
23 Я. В. В. 30 М 12.05.98 44 49 90 0,11
24 П. И. В. 31 М 17.05.98. 46 51 90 0,11
25 А. С. Б. 36 М 17.05.98. 51 55 92 0,07
26 С. А. И. 20 Ж 3.02.99. 44 51 86 0,15
27 М. И. В. 34 М 9.02.99. 48 54 89 0,13
28 Д. О. В. 37 Ж 9.02.99. 42 49 86 0,17
29 Т. С. Д. 22 М 16.02.99. 48 57 84 0,18
30 К. В. А. 28 М 9.04.99. 45 54 83 0,20
? 43 50 84,3 0,15
m 2,16 3,8
0,01
? 14,9 15,41
0,03
PAGE 1
OONO (пероксинитрит)
пероксидаза
каталаза
Токсическое действие
антимикробное действие
расслабление стенок
кровеносных сосудов
токсическое действие
+
Свойства антигенов
Удаление иммунных комплексов
Нормальный
катаболизм ИК
Соотношение Аг/Ат
Свойства иммунного комплекса
Свойства антител
Нарушение
катаболизма ИК
Отложение ИК
в тканях
Развитие болезней ИК
Нарушение
иммунорегуляции
Нашли опечатку? Выделите и нажмите CTRL+Enter
