Биосинтез дезоксирибонуклеотидов

ПЕНЗЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

ПЕНЗЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

Курсовая работа по биологической химии на тему:

БИОСИНТЕЗ ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕОТИДОВ. ИНГИБИТОРЫ ФЕРМЕНТОВ СИНТЕЗА
ДЕЗОКСИРИБОНУКЛЕОТИДОВ И ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ИХ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ
НОВООБРАЗОВАНИЙ

Пенза 2004

СОДЕРЖАНИЕ:

Введение…………………………………………………………………………3

1. Биосинтез пуриновых нуклеотидов…………………………………………4

2. Образование AMP и GMP из IMP……………………………………………7

3. Ингибиторы биосинтеза пуринов…………………………………………….9

4. Синтез пуриновых дезоксирибонуклеотидов…………………………………9

5. Тканевая специфичность биосинтеза пуринов………………………………11

6. Регуляция биосинтеза пуринов………………………………………………11

7. Биосинтез пиримидинов………………………………………………………15

8. Регуляция биосинтеза пиримидинов…………………………………………18

9. Ингибиторы ферментов синтеза дезоксирибонуклеотидов и их
использование для лечения злокачественных новообразований……………..20

10. Список литературы…………………………………………………………..24

ВВЕДЕНИЕ

Ни сами нуклеотиды, ни исходные пуриновые и пиримидиновые основания,
поступающие в организм человека с пищей, не включаются ни в нуклеиновые
кислоты тканей человека, ни в пуриновые или пиримидиновые коферменты,
такие, как АТР или NAD. Даже если пища богата нуклеопротеинами, клетки
человека все равно синтезируют предшественники нуклеиновых кислот из
амфиболических промежуточных соединений (интермедиатов). Путь синтеза de
novo позволяет синтетическим аналогам пуринов и пиримидинов с
антиканцерогенными свойствами включаться в состав ДНК.

Скорость синтеза пуриновых и пиримидиновых рибо- и
дезоксирибонуклеотидов является объектом тонкой регуляции.
Сформировались механизмы, обеспечивающие такой уровень продукции этих
соединений во времени, который удовлетворяет постоянно меняющиеся
физиологические потребности организма. Наряду с синтезом de novo
включаются так называемые пути «спасения», благодаря которым происходит
реутилизация пуриновых и пиримидиновых оснований высвобождаемых из
нуклеиновых кислот при деградации in vivo. К заболеваниям, которые
связаны с нарушениями обмена пуринов и пиримидинов, относятся подагра,
синдром Леша— Найхана, синдром Рейе, недостаточность
аденозин-дезаминазы, недостаточность пуриннуклеозидфосфорилазы.

1. Биосинтез пуриновых нуклеотидов

У человека и других млекопитающих пуриновые нуклеотиды синтезируются для
обеспечения потребностей организма в мономерных предшественниках
нуклеиновых кислот, а также в соединениях, выполняющих другие функции. У
некоторых позвоночных (птицы, земноводные, рептилии) синтез пуриновых
нуклеотидов несет дополнительную функцию — является частью механизма, с
помощью которого выводятся излишки азота в виде мочевой кислоты; такие
организмы называют урикотелическими. Организмы, у которых конечным
продуктом азотистого обмена является мочевина (как у человека), называют
уреотелическими. Поскольку урикотелические организмы удаляют «излишки»
азота в виде мочевой кислоты, синтез пуриновых нуклеотидов у них идет
более интенсивно, чем у уреотелических. В то же время пути синтеза
пуриновых нуклеотидов de novo — общие для обеих групп организмов.

Информация о происхождении каждого из атомов в молекуле пуринового
основания получена в процессе радиоизотопных исследований, проведенных
на птицах, крысах и человеке (рис. 1). На рис. 2 представлена схема пути
биосинтеза пуриновых нуклеотидов. Первая стадия {реакция 1)— образование
5-фосфорибозил-1-пирофосфата (ФРПФ). Эта реакция не уникальна для
биосинтеза пуриновых нуклеотидов. ФРПФ служит также предшественником в
синтезе пиримидиновых нуклеотидов (см. рис. 10), он необходим для
синтеза NAD и NADP—двух коферментов, в состав которых входит никотиновая
кислота. В реакции 2 (рис. 2), катализируемой
фосфорибозил-пирофосфат-амидотрансферазой, из ФРПФ и глутамина
образуются глутамат и 5-фосфорибозиламин. Хотя возможны и другие
механизмы синтеза 5-фосфорибозиламина, реакция, катализируемая
амидотрансферазой, имеет наиболее важное физиологическое значение в
тканях млекопитающих.

Рисунок 1. Происхождение атомов азота и углерода пуринового кольца.

Далее 5-фосфорибозйламин вступает в реакцию с глицином (реакция 3); при
этом образуется глицинами д-рибозилфосфат (глицинамидориботид, Г АР).
Амидная группа глутамина служит источником атома азота в положении 9
молекулы пурина (N-9), а глицин—источником атомов углерода в положениях
4 и 5 (С-4 и С-5) пуринового кольца. Эту реакцию катализирует
глицинамид-киносинтетаза. В реакции 4 атом азота N7 молекулы
глицинамид-рибозилфосфата формилируется N5,
N10-Me-тенилтетрагидрофолатом. В результате этой реакции, катализируемой
глицинамид-рибозил-фосфат-формилтрансферазой, поступающий
одно-углеродный фрагмент займет положение С-8 в формирующемся пуриновом
основании. В реакции 5 снова участвует глутамин — донор амидной группы.
Амидирование происходит по атому С-4 формилглицинамид-рибозилфосфата и
катализируется формилглицин-амидин-рибозилфосфатсинтетазой.
Присоединенный атом азота займет в молекуле пурина положение 3.

В результате замыкания имидазольного кольца, катализируемого
аминоимидазолрибозилфос-фатсинтетазой, образуется
аминоимидазол-рибозилфосфат (реакция 6). Далее синтез проходит через
стадию образования аминоимидазолкар-боксилат-рибозилфосфата (реакция 7).
В результате реакции формируется карбонильная группа, источником которой
служит молекула СО2, образующаяся в процессе дыхания.

Атом азота в положении 1 происходит из а-аминогруппы аспартата (реакция
8), остальная часть которого образует сукцинильный фрагмент в молекуле
аминоимидазолсукцинилкарбоксиламид-рибо-зилфосфата (АИСКАР).

В реакции 9 сукцинильная группа АИСКАР удаляется в виде фумарата.
Оставшийся аминоимида-золкарбоксиламид-рибозилфосфат формилируется
(реакция 10) N 10-формилтетрагидрофолатом (f10-Н4фолат) с образованием
амидоимидазолкарбокси-ламид-рибозилфосфата; реакция катализируется
соответствующей формилтрансферазой. Вновь присоединенный атом углерода,
подобно атому С-8, поступает из пула одноуглеродных фрагментов при
участии тетрагидрофолата и занимает в молекуле пурина положение 2.

Замыкание кольца (реакция 11) происходит с помощью IMP-циклогидролазы, в
результате образуется первый пуриновый нуклеотид—инозиновая кислота
(инозинмонофосфат; IMP).

Значение метаболизма фолатов

В процессе биосинтеза пуриновых нуклеотидов (рис. 2) атомы углерода в
положениях 8 и 2 поступают соответственно от N5,
М10-метенилтет-рагидрофолата и N10-формилтетрагидрофолата. Последний
образуется из N5, N10-метенилтетрагидрофолата, который в свою очередь
является продуктом NADP-зависимого дегидрогенирования N5,
N10-метилентетрагидрофолата. Если N5, N10-метилентетрагидрофолат служит
источником одноуглеродных фрагментов для многих акцепторов, то N5,

Рисунок 2. Путь биосинтеза de novo пуринов из рибозо-5-фосфата и АТР

N10-метенилтетрагидрофолат поставляет одноуглеродную группу (либо
непосредственно, либо через стадию образования
N10-формилтетра-гидрофолата) только в пурины. Из приведенных сведений
следует, что ингибирование процессов образования рассмотренных фолатов
оказывает тормозящее влияние и на синтез пуринов de novo.

2. Образование AMP и GMP из IMP

Как показано на рис. 3 адениновые (реакции 12 и 13) и гуаниновые
нуклеотиды (реакции 14 и 15) образуются путем аминирования и
соответственно окисления и аминирования общего
предшественника—инозинмонофосфата (IMP). Аминирование IMP протекает
через стадию образования промежуточного соединения, в котором аспартат
присоединяется к инозиновой кислоте, образуя аденилосукцинат. Эта
реакция напоминает реакцию 8 биосинтеза пуринов (рис. 2), в которой
а-азот аспарагиновой кислоты поставляет атом N-1 пуринового кольца.
Образование аденилосукцината катализируется аденилосукцинатсинтазой и
происходит при участии GTP. Удаление остающейся части аспарагиновой
кислоты в виде фумарата приводит к образованию адениловой кислоты
(аденозинмонофосфат; AMP). Отщепление фумарата от аденилосукцината
катализируется ферментом аденилосукциназой. Этот же фермент катализирует
отщепление фумарата от аминоимидазолсукцинилкарбоксамидрибозил-фосфата
(реакция 9).

Так же, в две стадии, из IMP образуется гуанозинмонофосфат (GMP). В
первой реакции на этом пути (реакция 14) при участии NAD и Н2О
происходит окисление IMP с образованием ксантинмонофосфата (ХМР). Затем
ХМР аминируется амидогруппой глутамина (реакция 15). Для этого процесса
необходим АТР, что в какой-то мере напоминает потребность в GTP при
превращении IMP в AMP.

Рисунок 3. Превращение IMP в AMP и GMP

3. Ингибиторы биосинтеза пуринов

Несколько антиметаболитов — аналогов глутамина оказывают сильное
ингибирующее воздействие на биосинтез пуринов. Азасерин
(О-диазо-ацетил-L-серин) выступает как антагонист глутамина, особенно в
реакции 5. Диазонорлейцин ([6-диазо-5-оксо]-L-норлейцин) блокирует
реакцию 2, а 6-меркаптопурин наряду с другими эффектами ингибирует
реакции 13 и 14 синтеза AMP и GMP соответственно. Микофеноловая кислота
подавляет реакцию 14.

Превращение AMP и GMP в соответствующие ди- и трифосфаты осуществляется
в две стадии (рис. 4). Реакции фосфорилирования — переноса фосфатных
групп от АТР—осуществляются нуклео-зидмонофосфаткиназой и
нуклеозиддифосфаткиназой.

Рисунок 4. Реакции фосфорилирования нуклеозидмонофосфата и
нуклеозиддифосфата.

4. Синтез пуриновых дезоксирибонуклеотидов

Синтез пуриновых и пиримидиновых дезоксирибонуклеотидов происходит путем
прямого восстановления 2′-углерода рибозного остатка соответствующего
рибонуклеотида, а не путем синтеза de novo из 2′-дезоксианалога ФРПФ.
Восстановление 2′-углеродного атома рибозы происходит только после
превращения пуриновых и пиримидиновых нуклео-тидов в соответствующие
нуклеозиддифосфаты. У некоторых бактерий в этом восстановительном
процессе участвует кобаламин (витамин В12). У животных процесс
восстановления идет и в отсутствие витамина В12. Восстановление
рибонуклеозиддифосфатов в дезоксирибонуклеозид-дифосфаты катализируется
рибонуклеотидредуктазой и требует участия тиоредоксина (белковый
кофактор), тиоредоксинредуктазы (флавопротеиновый фермент) и NADPH
(кофактор). Непосредственным донором электронов для нуклеотида является
тиоредоксин, который предварительно восстанавливается NADPH. Обратимое
окислительно-восстановительное превращение тиоредоксина катализируется
тиоредоксинредуктазой. Восстановление рибонуклеозиддифосфата
восстановленным тиоредоксином катализируется рибонуклеозидредуктазой
(рис. 5). Эта сложная ферментная система функционирует в клетках только
в период активного синтеза ДНК и деления.

Рисунок 5. Восстановление рибонуклеозиддифосфата до
2-дезокси-рибонуклеозиддифосфата.

5. Тканевая специфичность биосинтеза пуринов

Не во всех тканях человека происходит синтез пуриновых нуклеотидов de
novo. Эритроциты и полиморфноядерные лейкоциты не способны синтезировать
5-фосфорибозиламин, и поэтому для образования пуриновых нуклеотидов им
необходимы экзогенные пурины. Периферические лимфоциты способны
синтезировать небольшие количества пуринов de novo. Установлено, что в
клетках мозга млекопитающих содержатся очень малые количества
ФРПФ-амидотрансферазы, на этом основании был сделан вывод о зависимости
синтеза пуриновых нуклеотидов в мозге от поступления экзогенных пуринов.
Оказалось, что основным местом синтеза пуриновых нуклеотидов в организме
млекопитающих является печень. Из нее свободные основания или нуклеозиды
попадают в другие ткани, не способные к синтезу пуринов de novo.

6. Регуляция биосинтеза пуринов

На синтез молекулы IMP затрачивается энергия гидролиза шести
макроэргических фосфодиэфирных связей АТР, при этом в качестве
предшественников выступают глицин, глутамин, метенилтетрагидрофолат и
аспартат. Для экономии энергетических и питательных ресурсов важна
эффективная регуляция процесса биосинтеза пуринов de novo. Важнейшую
роль в этом процессе играет внутриклеточная концентрация ФРПФ. Она
определяется соотношением скоростей его синтеза, утилизации и
деградации. Скорость синтеза ФРПФ зависит от 1) наличия субстратов
синтеза, особенно рибозо-5-фосфата, и 2) каталитической активности
ФРПФ-синтазы, которая в свою очередь связана с внутриклеточной
концентрацией фосфатов, а также с концентрацией пуриновых и
пиримидиновых рибонуклеотидов, выступающих в роли аллостерических
регуляторов (рис. 6). Скорость утилизации ФРПФ в значительной степени
зависит от интенсивности цикла реутилизации пуриновых оснований, в ходе
которого ксантин и гуанин фосфорибозилируются до соответствующих
рибонуклеотидов. В меньшей степени скорость утилизации ФРПФ зависит от
интенсивности синтеза пуринов de novo. Этот вывод основан на следующем
наблюдении: в эритроцитах и культивируемых фибробластах мужчин с
наследственным нарушением активности
гипоксантин-гуанин—фосфо-рибозилтрансферазы уровень ФРПФ повышается в
несколько раз.

†

ham^@?yy

ham^@?

ham^@?thy

:b:–:?:?: :¤:1/4:Ue:TH:a:D;F;H;L;N;R;U;a;

Нашли опечатку? Выделите и нажмите CTRL+Enter