АКАДЕМІЯ МЕДИЧНИХ НАУК УКРАЇНИ

ДУ „ІНСТИТУТ НЕФРОЛОГІЇ АМН УКРАЇНИ”

ШЕВЧЕНКО ОЛЕНА ГЕННАДІЇВНА

УДК: 616.611-002-036.12:612.94.015.2

Роль цитокінів (інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12) у прогресуванні
хронічного гломерулонефриту

14.01.37 – нефрологія

Автореферат

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата медичних наук

Київ – 2008

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана в Харківському національному медичному університеті МОЗ
України.

НАУКОВИЙ КЕРІВНИК

доктор медичних наук, професор Семидоцька Жанна Дмитрівна,

Харківський національний медичний університет МОЗ України, завідувач
кафедри пропедевтики внутрішньої медицини № 2

ОФІЦІЙНІ ОПОНЕНТИ:

доктор медичних наук, професор Никула Тарас Денисович,

Національний медичний університет імені О. О. Богомольця, завідувач
кафедри пропедевтики внутрішньої медицини № 2;

доктор медичних наук, професор Топчій Іван Іванович, ДУ „Інститут
терапії ім. Л. Т. Малої АМН України”, м. Харків, завідувач відділу
нефрології.

Захист відбудеться „21„ березня 2008 року о 12 годині на засіданні
спеціалізованої вченої ради Д26.565.01 при ДУ„Інститут нефрології АМН
України” за адресою: 04053, м. Київ, вул. Ю. Коцюбинського, 9-А.

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці при ДУ „Інститут
нефрології АМН України” за адресою: 04053, м. Київ, вул. Ю.
Коцюбинського, 9-А.

Автореферат розісланий „20„ лютого 2008 року

Вчений секретар

спеціалізованої вченої ради,

кандидат медичних наук,

старший науковий співробітник
М.Б. Величко

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. Хронічний гломерулонефрит (ХГН) – захворювання, яке
характеризується постійним прогресуванням; розпочавшись, процес
поступово призводить до склерозування ниркової тканини (Atkins R., 2000;
Абрамова Т.В., 2005; Шулутко Б.І., 2005). Гальмування хронічної ниркової
недостатності (ХНН) залишається основною проблемою в нефрології. Ця
проблема актуальна більше тим, що на ХГН страждають в більшості
випадків особи молодого віку (Мухін І.В., 2000; Рябов С.И., 2000;
Тарєєва І.Є., 2000; Бездетко Т.В., 2001). В Україні середній вік хворих
з ХНН на тлі гломерулонефриту становить 39,4-5,4 років. Найчастішою
причиною ХНН є гломерулонефрит – 33-45 % ( Пиріг Л.А., Іванов Д.Д. та
ін., 2004; Колесник М.О., Сайдакова Н.О., 2006). Захворюваність на ХГН
складає 85-119 на 100 тис. населення (Никула Т.Д., Синяченко О.В.,
Семидоцька Ж.Д., 2003; Колесник М.О., Сайдакова Н.О., 2006 ).

Більшість гломерулопатій супроводжується появою у зоні пошкодження та
склерозу мононуклеарних лейкоцитів, що можуть продукувати широкий спектр
цитокінів (Богомазова С.Ю., Гладких О.П., Іванов А.А. та ін., 1997;
Топчій І.І., Щербань Т.Д., 2002; Bolton C.H., Downs L.G., 2001; Ohse T.,
Ota T., Kieran N., 2004;). Склеротичні зміни в нирковому інтерстиції
відбуваються як наслідок імунних та запальних процесів. У ґенезі цих
процесів особливу увагу приділяють дії цитокінів, чинників росту, їх
рецепторів та антагоністів (Ратнер М.Я, 1997; Гейниць О.О., Калюжин
В.В., 2004; Шишкин О.М., 2005; Корякова Н.Н., 2005).

Останнім часом у клінічній імунології активно вивчається та знаходить
подальший розвиток новий клас пептидів імунної системи — цитокіни
(Ковальчук Л.В., 1997; Segerer S., Nelson P.J., Schlondorf D., 2003;
Синяченко О.В., Ігнатенко І.В., Мухін І.В., 2006). Цитокіни – речовини
білкової природи, які продукуються клітинами переважно імунної системи
та є своєрідними медіаторами міжклітинних взаємодій (Медуніцин Н.В.,
1999; Тарєєва І.Є., 2000; Corwin E.J., 2000; Демьянова А.В., Котов А.Ю.,
Симбирцев А.С., 2003). Вони контролюють процеси проліферації,
диференціровки та функціональну активність всіх імунокомпетентних клітин
(Фрейдлін І.С., 1999; Шилов Є.М., 2000). Пропонують виділяти три групи
основних цитокінів, які мають велике значення у розвитку
гломерулонефриту: прозапальні, проліферативні та склерозуючі (Тарєєва
І.Є., 2000; Окороков А.Н., 2002; Caglar K., Reng Y., Pupim L.B., 2002).

Інтерлейкін – 6 (ІЛ-6) відноситься до основних інтерлейкінів, які
приймають участь у цитокіновій реакції у гломерулярній зоні та
інтерстиції (Fernandez-Real J. M., Vayreda M., 2001; Pecoits-Filho R.,
Lindholm B., Axelsson J., Stenvinkel P., 2003). Інтерлейкін – 12
(ІЛ-12), спочатку відомий як NKSF (natural killer cellstimulatory
factory) останнім часом розглядається як основний чинник, який
забезпечує зв?язок фагоцитів та лімфоцитів у регуляції адаптивного
імунітету (Кетлінський С.А., Калиніна Н.М., 1995; Ярилін О.О., 1997;
Фрейдлін І.С., 1999; Timoshanko J. R., Kitching A. R., 2001).
Спрямованість та ефективність дії цитокінів пов’язана з наявністю
рецепторів, які знаходяться на поверхні мембрани клітин-мішеней (Gately
M.K., Renzetti L.M., 1998; Postiglione L., Cianciaruso B., 2000; Bolton
C.H., Downs L.G., Victory J.G., 2001). Інтерлейкін – 6 та інтерлейкін –
12 мають загальну субодиницю – гликопротеїн gp130, яку використовують
для проведення сигналу до клітини. Наявність загального трансдуктора
сигналу передбачає ще й спільність біологічних функцій цитокінів (Ross
R., 1999; Wolert K.C., Drexler H., 2000; Jones S.A., Horiuchi S., Topley
N., Yamamoto N., Fuller G.M., 2001).

Посилення продукції деяких цитокінів запалення або чинників, які
стимулюють утворення лімфоцитів, може лежати в основі багатьох
захворювань. У той же час зниження рівня низки цитокінів також може
провокувати розвиток і прогресування захворювання (Бреннер Б.М., 1999;
Ватурина Т.В., Сергеева Т.В., 2002). Тому, ми вважали доцільним вивчити
роль прозапальних цитокінів, а саме інтерлейкіну–6 та інтерлейкіну–12, у
прогресуванні хронічного гломерулонефриту на різних стадіях хронічної
хвороби нирок.

Зв?язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Обране
дослідження входить до плану науково-дослідних робіт Харківського
національного медичного університету. Дисертаційна робота виконана у
руслі науково-дослідної роботи кафедри пропедевтики внутрішньої медицини
№2 ХНМУ “Хронічна ниркова недостатність: особливості перебігу та чинники
прогресування”, державний реєстраційний № 0199U001776. Дисертант вивчила
рівень інтерлейкіну–6 та інтерлейкіну–12 у хворих на ХГН на різних
стадіях хронічної хвороби нирок.

Біоетичною експертизою схвалено проведення даного дисертаційного
дослідження.

Мета дослідження: покращення діагностики та прогнозування темпів
прогресування хронічного гломерулонефриту на різних стадіях хронічної
хвороби нирок з урахуванням дослідження інтерлейкіну-6 та
інтерлейкіну-12.

Задачі дослідження:

Вивчити клініко-лабораторні особливості та характер перебігу хронічного
гломерулонефриту на різних стадіях хронічної хвороби нирок.

Дослідити рівень інтерлейкіну-6 у крові хворих на хронічний
гломерулонефрит на різних стадіях хронічної хвороби нирок.

Дослідити рівень інтерлейкіну-12 у крові хворих на хронічний
гломерулонефрит на різних стадіях хронічної хвороби нирок.

Порівняти стан показників інтерлейкінів з функціональним станом нирок у
хворих на хронічний гломерулонефрит.

На підставі оцінки клініко-лабораторних особливостей гломерулонефриту
встановити цитокінові чинники ризику його прогресування.

Об?єкт дослідження : ХХН: хронічний гломерулонефрит.

Предмет дослідження: вміст інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 у плазмі
крові хворих на хронічний гломерулонефрит на різних стадіях ХХН.

Методи дослідження: клінічні, лабораторні: біохімічні, імунологічні,
імуноферментні, інструментальні та статистичні.

Наукова новизна результатів дослідження. Вперше у даній дисертації
отримала подальший розвиток проблема прогресування хронічного
гломерулонефриту. Результати проведених досліджень розширили уяву про
патогенез гломерулонефриту, його прогресування та розвиток хронічної
ниркової недостатності. Поруч з гемодинамічними та метаболічними
чинниками прогресування була виявлена роль цитокінів, а саме
інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 у прогресуванні гломерулонефриту та
хронічної ниркової недостатності, можливість прогнозування темпів їх
розвитку.

Було встановлено збільшення вмісту інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 у
крові хворих на хронічний гломерулонефрит на різних стадіях ХХН.

Доведено, що збільшення вмісту інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 у
крові відображає важкість запального процесу у нирках та стан імунної
системи організму.

Практичне значення отриманих результатів. Результати проведеного
дослідження дозволяють рекомендувати вивчення вмісту інтерлейкіну-6 та
інтерлейкіну-12 у процесі динамічного спостереження за хворими на
хронічний гломерулонефрит як критерій прогнозування перебігу
захворювання. Збільшення рівнів інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 у
плазмі крові є маркерами прогресування хронічного гломерулонефриту та
відображають важкість захворювання.

Результати дисертаційної роботи впроваджені у практичну діяльність
лікувальних та наукових закладах м. Харкова (Обласного клінічного центру
урології та нефрології ім. В.І.Шаповала; ДУ „Інститут терапії ім. Л.Т.
Малої АМН України”) та м. Києва (Київська міська клінічна лікарня № 3,
поліклініка № 3 Оболонського району).

Теоретичні та практичні результати використовуються у педагогічному
процесі на кафедрах терапевтичного профілю Харківського національного
медичного університету.

Особистий внесок здобувача. Автором самостійно проведено
патентно-інформаційний пошук, аналіз наукової літератури за темою, що
вивчалася, організація підбору тематичних хворих та їх обстеження.

Автором самостійно було розроблено та заповнено формалізовану карту
історії хвороби пацієнтів, оформлено первинну медичну документацію
тематичних хворих, сформовано та статистично оброблено комп’ютерну базу
даних, сформульовані основні положення дисертації, висновки та практичні
рекомендації. Оформлення всіх розділів дисертаційної роботи,
автореферату автором було проведено самостійно. Дисертант виконала
підготовку публікацій до друку та матеріалів для доповідей. У
публікаціях, що надруковані у співавторстві, автор проводила огляд
сучасної літератури, забезпечувала підбір та обстеження пацієнтів, брала
участь у проведенні лабораторних досліджень, проводила статистичну
обробку отриманих результатів, проводила підготовку до друку.

Дисертантом не було використано результатів та ідей співавторів
публікацій.

Апробація роботи. Основні положення та результати дисертаційної роботи
доповідалися та обговорювалися на науково-практичних конференціях
кафедри ПВМ № 2 ХДМУ (2002-2005), Пленумі української асоціації
нефрологів (Одеса, 2007), II Національному конгресі з алергології та
клінічної імунології (Миргород, 2007 р.), на засіданні апробаційної
вченої ради Харківського національного медичного університету ( Харків,
2007).

Публікації. За матеріалами дисертаційної роботи опубліковано 8 наукових
робіт, з яких 4 статті у наукових журналах, рекомендованих ВАК України,
в тезах – 3, отриманий патент України на корисну модель № 21492.

Структура та обсяг дисертації. Дисертаційна робота викладена на 142
сторінках машинописного тексту та складається зі вступу, огляду
літератури, матеріалів та методів дослідження, двох розділів власних
досліджень та обговорення їх результатів, висновків, практичних
рекомендацій та переліку використаних літературних джерел, який містить
251 найменування (123 кирилицею та 128 латиницею), що складає 26
сторінок. Робота ілюстрована 17 таблицями, 19 рисунками, 10 витягами з
історій хвороб.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Матеріали та методи дослідження. Для вирішення поставлених задач нами
було обстежено 85 осіб, з яких 75 – хворі на ХГН, що знаходилися на
лікуванні у нефрологічному відділенні Харківського обласного клінічного
центру урології та нефрології ім. В.І. Шаповала та 10 відносно здорових
осіб, які склали групу контролю. Більшість хворих знаходилась у віці від
31 до 40 років (26,6%), у віці від 21 до 30 років — 22,7%, від 41 до 51
років — 22,7%, від 51 до 60 років – 16%, старіше 61 року – 8% та тільки
4% складали хворі у віці до 20 років. Серед обстежених осіб більшість
складали жінки (56%). У роботі використано загальні клінічні методики:
вивчення анамнезу, об’єктивних даних, результатів загальних аналізів
крові, сечі, біохімічних показників крові (сечовини та креатиніну,
загального білку, електролітів), визначення добової протеїнурії.
Функціональний стан нирок оцінювався за швидкістю клубочкової фільтрації
(ШКФ), розрахованою за формулою Cockroft-Gault:

кліренс креатиніну = 140–вік (роки) x маса тіла (кг) x 810

креатинін сироватки (ммоль/л)

Рівні інтерлейкінів (ІЛ-6 та ІЛ-12) визначали за допомогою
імуноферментного набору CYTELISATM фірми CYTIMMUNE (США).

Діагноз формулювали на підставі класифікації хронічної хвороби нирок
(ХХН) запропонованої (NKF USA від 2002 року) та затвердженої на II
З’їзді нефрологів України у вересні 2005 року.

Усі хворі були поділені на 5 груп: 1 група – 18 хворих із ХХН I стадії
(ШКФ — 112,09+3,6 мл/хв.); 2 група – 18 хворих із ХХН II стадії (ШКФ —
74,0+1,5 мл/хв.); 3 група – 12 хворих із ХХН III стадії (ШКФ — 42,6+1,5
мл/хв.); 4 група – 11 хворих із ХХН IV стадії (ШКФ -21,76+1,2 мл/хв.); 5
група – 16 хворих із ХХН V стадії (ШКФ — 8,9+0,5 мл/хв.). Хворі були
розподілені на підгрупи за умови наявності нефротичного синдрому,
синдрому артеріальної гіпертензії, ізольованого сечового синдрому,
анемії. Кількість хворих з наявністю ізольованого сечового синдрому
(ІСС) зменшувалася по мірі зростання ниркової недостатності та складала
у групі хворих з ХХН I стадії — 38,9% (7 осіб), у групі хворих з ХХН II
стадії – 38,9% (7 осіб). У хворих з ХХН III стадії, ХХН IV стадії та
ХХН V стадії до сечового синдрому приєднувався синдром артеріальної
гіпертензії, анемія. Хворі з наявністю анемії у групі з ХХН IV стадії
складали 36,4 % (4 особи), у підгрупі з ХХН V стадії складали 100% (16
осіб). Кількість хворих з синдромом артеріальної гіпертензії (САГ)
збільшувалася від I до V стадії ХХН та складала у групі хворих з ХХН I
стадії — 38,9% (7 осіб), у групі хворих з ХХН II стадії – 27,8% (5
осіб), у групі хворих з ХХН III стадії — 58,3% (7 осіб), з ХХН IV стадії
— 72,7% (8 осіб) та у групі хворих з ХХН V стадії – 68,8% (11осіб).
Підгрупа хворих з нефротичним синдромом складала при ХХН I стадії —
22,2% (4 особи), при ХХН II стадії – 33,3% (6 осіб), при ХХН III стадії
– 41,7% (5 осіб), при ХХН IV стадії – 27,3% (3 особи), при ХХН V стадії
— 31,2% (5 осіб).

Статистичний аналіз результатів виконано у відповідності з
загальноприйнятими методами обробки емпіричних даних. Показники, які
підкорювалися нормальному розподіленню, були представлені у вигляді М
(середнє значення) та стандартної похибки середнього (m). При виявленні
статистичної різниці між групами проводили парне порівняння груп з
використанням t-критерію Ст’юдента та коефіцієнта кореляції.
Статистичний показник вважався достовірним у випадку р<0,05. Статистична обробка матеріалу проводилася за допомогою програми „Microsoft Excel”. Результати власних досліджень та їх обговорення. При аналізі отриманих результатів обстеження встановлено збільшення концентрації інтерлейкінів (ІЛ-6 та ІЛ-12) вже на початкових стадіях захворювання, а по мірі прогресування ХХН концентрація інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 зростала. Рівень інтерлейкіну-6 перевищував контрольні показники у групі з ХХН III стадії (p<0,01), при порівнянні у групах з ХХН I, ХХН II та ХХН IV, ХХН V стадій вірогідної різниці не виявлено (Рис.1). Рис. 1. Рівень інтерлейкіну-6 у крові хворих на хронічний гломерулонефрит в залежності від стадії ХХН. Примітка: * - p<0,01 – – у порівнянні з контрольною групою. Спостерігалася також суттєва різниця рівня даного цитокіну у підгрупах з різними клінічними синдромами ХГН у групах з ХХН II стадії, ХХН III стадії, ХХН IV стадії, ХХН V стадії (Рис.2). Так, у хворих на ХГН з ізольованим сечовим синдромом (ІСС) рівень ІЛ-6 вірогідно не відрізнявся від контрольної групи, але був вірогідно нижчий, ніж у групі з НС (p<0,05). У підгрупах хворих з САГ та НС показники ІЛ-6 вірогідно відрізнялись від показників контрольної групи (p<0,05 відповідно) (Табл.1). Таблиця 1 Рівень ІЛ-6 (М+m) пг/мл у крові хворих на ХГН в залежності від стадії ХХН та клінічного синдрому Клінічний синдром ХХН I ст. n=18 ХХН II ст. n=18 ХХН III ст. n=12 ХХН IV ст. n=11 ХХН V ст. n=16 ІСС n=14 21,9+1,9 23,3+1,04 САГ n=38 24,9+7,3 21,04+0,4 # 28,07+3,04* 23,3+1,7 23,8+1,6 НС n=23 23,5+2,8 24,3+3,1 28,9+4,7 31,5+5,3* 25,5+2,0* Контрол. група n=10 20,02 + 1,84 Примітки: 1)* - p<0,05 у порівнянні з контрольною групою; 2) #- p<0,05 у порівнянні з групою ХХН III ст. . Рис.2. Рівень ІЛ-6 у крові хворих на ХХН: ГН в залежності від клінічних синдромів. Примітки: 1)*- р<0,05 у порівнянні з контрольною групою; 2)# - р<0,05 у порівнянні з групою з ІСС. Рівень ІЛ-12 у досліджуваних групах (ХХН II стадії, ХХН III стадії, ХХН IV стадії, ХХН V стадії) вірогідно перевищував відповідно до контрольних показників (p<0,01, p<0,01, p<0,01, р<0,001 відповідно) (Рис.3). Рис.3. Рівень ІЛ-12 у крові у хворих на хронічний гломерулонефрит в залежності від стадії ХХН . Примітки: 1)* - р<0,01 – у порівнянні з контрольною групою; 2)**р<0,001 – у порівнянні з контрольною групою. В усіх групах спостерігалася суттєва різниця рівня даного цитокіна (ІЛ-12) в залежності від клінічного синдрому, що супроводжував перебіг ХГН (Рис.4). Так, у хворих на ХГН з ІСС рівень ІЛ-12 був вірогідно нижчий, ніж у групі з САГ та НС (p<0,05, p<0,01 відповідно) (Табл.2). Таблиця 2 Рівень ІЛ-12 (М+m) пг/мл у крові хворих на ХГН в залежності від в стадії ХХН та клінічного синдрому Клінічний синдром ХХН I ст. n=18 ХХН II ст. n=18 ХХН III ст. n=12 ХХН IV ст. n=11 ХХН V ст. n=16 ІСС n=14 25,9+1,5 27,1+2,0 САГ n=38 26,6+1,9 25,6+0,9 32,9+0,8** 32,6+1,3** 32,6+1,3** НС n=23 25,8+2,0 33,7+2,9* 36,2+0,3** 39,7+5,4# 36,5+4,2# Контрол. група n=10 24,53+ 0,64 Примітки: 1)* - p<0,01 у порівнянні з контрольною групою; 2)**- p<0,001 у порівнянні з контрольною групою; 3)#- p<0,05 у порівнянні з контрольною групою. Рис.4. Рівень ІЛ-12 у крові хворих на ХХН: ГН в залежності від клінічних синдромів. Примітки: 1)* - p<0,01 у порівнянні з контрольною групою; 2)**- p<0,001 у порівнянні з контрольною групою; ? 1/4 TH a a ae ae & : < \ N v z ? e ? 1/4 a ae ^ N P x z i yooooooooyyyyyooyyyynnnnnnnn @ i @ _H _H _H § § + + 0?:?T?V?X?I?N‰P‰V‰th‰oeizulll`T 4 6 H J ?y # - p<0,05 у порівнянні з групою з САГ. Таким чином, у хворих на ХХН: ГН при наявності НС, який призводить до перевантаження епітелію проксимальних канальців, що активує Т-хелпери, гени запальних та вазоактивних речовин (цитокіни, ендотеліни), які секретуються в збільшеній кількості через базальні відділи тубулярних клітин, та САГ, що веде до пошкодження мезангію та ендотелію клубочка, місцевому накопиченню тромбоцитів та макрофагів, які звільнюють чинники росту, визначені найбільш високі рівні цитокінів (ІЛ-6 та ІЛ-12). Проведений кореляційний аналіз визначив, що у групах хворих з ХХН I та II стадії спостерігався позитивний кореляційний зв’язок між ШКФ та рівнем ІЛ-6 в підгрупі хворих з нефротичним синдромом (r=+0,5,p<0,05; r=+0,8,p<0,05 відповідно) та рівнем ІЛ-12 (r=+0,7,p<0,05; r=+0,6,p<0,05 відповідно), але по мірі прогресування захворювання у хворих з ХХН III стадії відмічена негативна кореляція між ШКФ та рівнем ІЛ-12 (r=-0,6,p<0,05) у групі в цілому, а при ХХН IV та V стадії кореляції не спостерігалося взагалі. Визначали наявність кореляційних зв’язків між рівнем цитокінів (ІЛ-6 та ІЛ-12) та артеріальним тиском. У підгрупі з САГ при ХХН II стадії спостерігався зворотній кореляційний зв’язок між АТ та ІЛ-6 (r=-0,7,p<0,05) та ІЛ -12 (r=-0,9,p<0,05), та при ХХН V стадії (r=-0,6,p<0,05; r=-0,5,p<0,05 відповідно). У підгрупі з НС кореляційний зв’язок був наступним: у групі з ХХН I та II стадії (r=-0,9,p<0,05; r=-0,8,p<0,05 відповідно), у групі з ХХН IV стадії (r=-0,5,p<0,05; r=-0,6,p<0,05 відповідно), та в групі з ХХН V стадії (r=-0,3,p<0,05; r=-0,5,p<0,05 відповідно). При ІСС спостерігався прямий кореляційний зв’язок при ХХН I стадії для ІЛ-6 (r=+0,6,p<0,05), але для ІЛ-12 (r=-0,5,p<0,05); при ХХН II стадії для ІЛ-6 (r=+0,6,p<0,05) та ІЛ-12 (r=+0,7,p<0,05). Так ми спостерігали доволі різну кореляційну залежність, що може показувати залежність продукції інтерлейкінів від артеріальної гіпертензії, яка є одним із факторів прогресування хронічного гломерулонефриту. Артеріальна гіпертензія сприяє пошкодженню нефронів та склерозуванню нирок. Вона поглиблює внутрішньоклубочкову гіпертензію та ішемію нирок, що веде до синтезу цитокінів, а також виведенню їх з сечею з відповідним зниженням їх рівня в крові. Визначена пряма кореляційна залежність між рівнем добової протеїнурії та рівнем ІЛ-6 при НС у групі з ХХН II стадії (r=+0,6,p<0,05) та з ХХН V стадії (r=+0,9,p<0,05); для ІЛ-12 у групі з ХХН IV стадії (r=+0,6,p<0,05), що можливо обумовлено дисфункцією канальцевого епітелію, викликаним функціональним перенавантаженням молекулами протеїнів, яка призводить до активації інтерстиціального процесу завдяки клітинним сигналам, залучанням у процес макрофагів, цитокінів та остеопоніну. В інших групах кореляції не виявлено. Цитокіни завжди утворюються та діють в комбінації, що зв’язано зі схожістю умов продукції та дії. Підтверджує дану думку прямий кореляційний зв’язок між рівнем інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 у крові хворих з ХХН: ГН в усіх групах в цілому (r=+0,4,p<0,05). Так, кореляційна залежність між рівнями ІЛ-6 та ІЛ-12 в крові у хворих з ХХН I стадії: ГН мала характер тісного прямого зв’язку (r=+0,6, р<0,05) в цій групі в цілому. У підгрупі з САГ та НС також виявлена пряма кореляційна залежність (r=+0,9, р<0,05; r=+0,6, р<0,05 відповідно). В підгрупі з ІСС кореляції не виявлено (r=-0,1) (Рис.5). Рис.5. Рівень ІЛ-6 та ІЛ-12 у крові хворих ХХН I стадії. Зв’язок між рівнями ІЛ-6 та ІЛ-12 в крові хворих при ХХН II стадії: ГН носив характер прямої кореляційної залежності (r=+0,5,р<0,05) в усій групі. Пряма кореляція була виявлена у підгрупі з САГ та НС (r=+0,9,р<0,05; r=+0,6,р<0,05 відповідно), в підгрупі з сечовим синдромом кореляції не виявлено (r=-0,1) (Рис.6). Рис.6. Рівень ІЛ-6 та ІЛ-12 у крові хворих ХХН II стадії. Взаємозв’язок між рівнями ІЛ-6 та ІЛ-12 у групі з ХХН III стадії мав характер прямої кореляційної залежності (r=+0,4,р<0,05), у підгрупі з САГ- r=+0,6,р<0,05; що говорить про тісний взаємозв’язок цих цитокінів один з одним у патогенезі хронічного гломерулонефриту. Цитокіни сильно впливають на виробку один одного: вони можуть включати продукцію цитокінів, часто посилювати їх виробку, рідше інгібувати її. У підгрупі з НС кореляції не виявлено (r=+0,2) (Рис.7). Рис.7. Рівень ІЛ-6 та ІЛ-12 у крові хворих ХХН III стадії. При проведенні кореляційної залежності між рівнями ІЛ-6 та ІЛ-12 у крові хворих на ХХН IV ст.: ГН спостерігався прямий кореляційний зв’язок (r=+0,7,p<0,05) в усіх підгрупах. У підгрупах з САГ та НС виявлена пряма кореляційна залежність (r=+0,5,р<0,05; r=+0,9,р<0,05 відповідно), тобто при підвищенні рівня одного інтерлейкіну відбувається продукція іншого. Це говорить про функціональну єдність цих цитокінів. Схожість між рецепторами цитокінів обумовлює схожість ефектів цих цитокінів ( Рис.8). Рис.8. Рівень ІЛ-6 та ІЛ-12 у крові хворих ХХН IV стадії. Взаємозв’язку ІЛ-6 та ІЛ-12 у хворих з ХХН V ст.: ГН не виявлено. У підгрупі з САГ та НС також кореляції не виявлено (r=+0,2; r=-0,2 відповідно) (Рис.9). У колі взаємовідношень цитокінів практично всі ефекти стимулюючі; лише ІЛ-6 має подвійну роль у розвитку запалення, за своїми ефектами він є типовим прозапальним цитокіном, але він також має протизапальну дію, обмежуючи виробку інших прозапальних цитокінів. ІЛ-6 як би завершує формування запального процесу. Рис.9. Рівень ІЛ-6 та ІЛ-12 у крові хворих ХХН V стадії. Кореляційний аналіз між рівнями ІЛ-6 та ІЛ -12 та вищезазначеними показниками носив різноманітний характер та не залежав від форми та важкості захворювання. Дія цитокінів тісно зв’язана з фізіологічними та патофізіологічними реакціями організму. Посилення продукції визначених цитокінів може лежати в основі захворювання, а саме ХХН: ГН. В той же час зниження рівнів цих цитокінів також має місце при прогресуванні захворювання. Таким чином, не викликає сумніву, що цитокіни можуть служити важливими чинниками імунопатогенезу хронічної хвороби нирок, зокрема хронічного гломерулонефриту. ВИСНОВКИ У дисертаційній роботі доказано, що прозапальні цитокіни, а саме інтерлейкін-6 та інтерлейкін-12 відіграють суттєву роль у прогресуванні хронічного гломерулонефриту. 1. На всіх стадіях ХХН має місце підвищення рівня ІЛ-12 в крові, найбільш виражене при ХХН III, IV,V стадій. Рівень ІЛ-12 в крові найбільш високий при нефротичному синдромі; при артеріальній гіпертензії вміст цього інтерлейкіну вірогідно нижчий, ніж при нефротичному синдромі. Вірогідної відмінності рівня ІЛ-12 при ізольованому сечовому синдромі не виявлено. 2. Рівень ІЛ-6 в крові помірно підвищений при ХХН III стадії та знижується при подальшому прогресуванні хвороби, відображаючи вираженість гострої фази запалення при гломерулонефриті, яка зменшується по мірі прогресування склеротичних процесів в нирках. 3. Рівень ІЛ-6 в крові найбільш високий при нефротичному синдромі, зростає до ХХН IV стадії та знижується при термінальній уремії. При синдромі артеріальної гіпертензії рівень ІЛ-6 в крові підвищений максимально при ХХН III стадії. Помірне підвищення рівня ІЛ-6 в крові при ізольованому сечовому синдромі відмічено при ХХН II стадії. 4. При ХХН I стадії спостерігаються найбільш високі показники ІЛ-6 та ІЛ-12 у підгрупі хворих з синдромом артеріальної гіпертензії. По мірі прогресування захворювання, починаючи з ХХН II стадії, найбільш високі показники ІЛ-6 та ІЛ-12 спостерігаються у підгрупі хворих з нефротичним синдромом. 5. Визначені прямі та зворотні кореляційні зв’язки різної вираженості між ІЛ-6 та ІЛ-12 та іншими чинниками прогресування ХГН з нефротичним синдромом та артеріальною гіпертензією (систолічним та діастолічним АТ, протеїнурією, креатиніном, ШКФ, також з віком хворих та тривалістю перебігу хвороби). 6. Відмічені позитивні кореляційні зв’язки між ІЛ-6 та ІЛ-12. Максимальні при ХХН I стадії (r=+0,6;p<0,05) та поступово зменшуються по мірі прогресування гломерулонефриту (при ХХН II стадії - r=+0,5;p<0,05; ХХН III стадії - r=+0,4). При ХХН IV стадії знову з’являється підвищення кореляційного зв’язку між інтерлейкінами (r=+0,7;p<0,05), а при термінальній уремії кореляційні зв’язки зникають (r=+0,1). 7. Підвищення рівня ІЛ-6 в крові відображає активність запалення гострої фази при гломерулонефриті, що найбільш виражена при ХХН III стадії та зменшується при подальшому прогресуванні хвороби. Рівень ІЛ-12 в крові відповідає темпам прогресування фібропластичних, склеротичних процесів, які найбільш виражені при нефротичному синдромі при ХХН IV та V стадії. ПРАКТИЧНІ РЕКОМЕНДАЦІЇ У процесі динамічного спостереження за хворими на хронічний гломерулонефрит з метою поліпшення діагностики та прогнозування перебігу хвороби рекомендується дослідження вмісту ІЛ-6 та ІЛ-12 в крові. Підвищення рівня ІЛ-12 та зниження рівня ІЛ-6 в крові в динаміці перебігу гломерулонефриту може використовуватися, як критерій несприятливого прогнозу. Дослідження рівня ІЛ-6 в крові може використовуватися, як додатковий критерій активності імунозапального процесу в нирках. Дослідження рівня ІЛ-12 в крові можна рекомендувати для діагностики інтенсивності склеротичних процесів при хронічному гломерулонефриті. ПЕРЕЛІК НАУКОВИХ ПРАЦЬ, ОПУБЛІКОВАНИХ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ Семидоцкая Ж. Д., Шевченко А. Г. Содержание интерлейкина–6 и интерлейкина–12 у больных хроническим гломерулонефритом на разных стадиях хронической болезни почек // Український журнал нефрології та діалізу.- 2007.- № 4 (16).- С. 41-45. Здобувач самостійно виконала збір матеріалу, провела аналіз та узагальнила результати дослідження, підготовила статтю до друку. Шевченко А. Г. Роль интерлейкина-12 в прогрессировании хронического гломерулонефрита на разных стадиях хронической болезни почек // Експериментальна та клінічна медицина.- 2007.- № 4.- С. 44-47. Шевченко А. Г. Роль интерлейкина-6 в прогрессировании хронического гломерулонефрита на разных стадиях хронической болезни почек // Медицина сегодня и завтра. - 2007.- № 3.- С. 66-68. Пат. на корисну модель № 21492. Україна. МПК G01N 33/00. Спосіб діагностики клінічних форм хронічного гломерулонефриту у хворих з достатньою функцією нирок / Семидоцька Ж. Д., Шевченко О. Г.- Заявл. 09.10.2006; Опубл. 15.03.2007, Бюл. № 3.- 4 c. Шевченко А. Г. Содержание интерлейкина–6 и интерлейкина–12 у больных хроническим гломерулонефритом на разных стадиях хронической болезни почек // Українська асоціація нефрологів: Матеріали Пленуму, Одеса, 2007.- Т.1.- С.69. Шевченко А. Г. Роль интерлейкина-6 в прогрессировании хронического гломерулонефрита на разных стадиях хронической болезни почек // Імунологія і алергологія.- 2008.- № 1.- С. 87. Шевченко А. Г. Роль интерлейкина-12 в прогрессировании хронического гломерулонефрита на разных стадиях хронической болезни почек // Імунологія і алергологія.- 2008.- № 1.- С. 87. Шевченко О. Г. Дослідження інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12 у хворих на хронічний гломерулонефрит на різних стадіях хронічної хвороби нирок // Український науково-медичний молодіжний журнал. .- 2008.- № 1-2.- С. 2-5. АНОТАЦІЯ Шевченко О.Г. Роль цитокінів (інтерлейкіну-6 та інтерлейкіну-12) у прогресуванні хронічного гломерулонефриту.- Рукопис. Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 14.01.37 – нефрологія.- ДУ „Інститут нефрології АМН України”, Київ, 2008. Дисертація присвячена поліпшенню діагностики та прогнозування темпів прогресування хронічного гломерулонефриту на різних стадіях хронічної хвороби нирок з урахуванням дослідження цитокінів (ІЛ-6 та ІЛ-12). У роботі досліджувалися рівні цитокінів (ІЛ-6 та ІЛ-12) у крові хворих на ХГН на різних стадіях ХХН. Отримані показники інтерлейкінів порівняли з функціональним станом нирок у хворих на ХГН. На підставі оцінки клініко-лабораторних та морфологічних особливостей гломерулонефриту встановили цитокінові чинники ризику прогресування ХГН. Виявлено підвищення рівня ІЛ-12 у крові, найбільш виражене при ХХН III, IV,V стадій, що відповідає темпам прогресування фібропластичних, склеротичних процесів та помірне підвищення рівня ІЛ-6 у крові при ХХН III стадії, який знижується при подальшому прогресуванні хвороби, що може відображати активність запалення гострої фази при гломерулонефриті. Показано, що у хворих з нефротичним синдромом та при наявності артеріальної гіпертензії рівні ІЛ-6 та ІЛ-12 найбільш високі. Встановлена кореляційна залежність між цитокінами, що вивчалися, та іншими чинниками прогресування ХГН (артеріальною гіпертензією, протеїнурією, креатиніном, ШКФ, також з віком хворих та тривалістю перебігу хвороби). Ключові слова: хронічна хвороба нирок, хронічний гломерулонефрит, цитокіни, інтерлейкін-6, інтерлейкін-12, швидкість клубочкової фільтрації. АННОТАЦИЯ Шевченко А.Г. Роль цитокинов (интерлейкина-6 и интерлейкина-12) в прогрессировании хронического гломерулонефрита.- Рукопись. Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по специальности 14.01.37.- нефрология.- ГУ „Институт нефрологии АМН Украины”, Киев, 2008. Диссертация посвящена улучшению диагностики и прогнозированию темпов прогрессирования хронического гломерулонефрита на разных стадиях хронической болезни почек с учетом исследования цитокинов (ИЛ-6 и ИЛ-12). Обследовано 85 человек, из них 75 пациентов с ХГН на разных стадиях ХБП и 10 практически здоровых человек из контрольной группы. Все больные были разделены на 5 групп в зависимости от показателей СКФ, что определяло стадию ХБП (I стадия – 18 больных, II стадия – 18 больных, III стадия – 12 больных, IV стадия – 11 больных, V стадия – 16 больных). Также больные были разделены на подгруппы в зависимости от клинико-лабораторных синдромов (изолированного мочевого - 14 человек, синдрома артериальной гипертензии – 38 человек, нефротического синдрома – 23 человека). Кроме общепринятых исследований, проводилось определение уровней цитокинов (ИЛ-6 и ИЛ-12) в крови методом иммуноферментного анализа. Проведенные исследования позволили выявить повышение уровней ИЛ-6 и ИЛ-12 на всех стадиях ХБП. Наиболее высокий уровень ИЛ-12 наблюдался при ХБП на III, IV,V стадиях, что соответствует темпам прогрессирования фибропластических, склеротических процессов. Умеренное повышение уровня ИЛ-6 в крови имело место при ХБП III стадии, который уменьшался при дальнейшем прогрессировании болезни, что может отражать активность воспаления острой фазы при гломерулонефрите. Наблюдались более высокие уровни ИЛ-6 и ИЛ-12 у больных в подгруппах с НС и САГ. При ИМС достоверного повышения уровней данных интерлейкинов не наблюдалось. Выявлены как прямые, так и обратные корреляционные связи разной выраженности между ИЛ-6 и ИЛ-12, а также другими факторами прогрессирования ХГН (артериальной гипертензией, протеинурией, СКФ, возрастом, длительностью заболевания и др.). Максимальная корреляционная зависимость между ИЛ-6 и ИЛ-12 наблюдалась при ХБП I стадии (r=+0,6;p<0,05), постепенно уменьшалась по мере прогрессирования гломерулонефрита (при ХБП II стадии - r=+0,5;p<0,05; ХБП III стадии - r=+0,4). При ХБП IV стадии появлялось повышение корреляционной связи между интерлейкинами (r=+0,7;p<0,05), а при терминальной уремии корреляционная связь отсутствовала (r=+0,1). Проведенные исследования показали, что цитокины (ИЛ-6 и ИЛ-12) могут служить важными факторами иммунопатогенеза ХБП, а именно ХГН. Ключевые слова: хроническая болезнь почек, хронический гломерулонефрит, цитокины, интерлейкин-6, интерлейкин-12, скорость клубочковой фильтрации. ANNOTATION Shevchenko A.G. Role of Cytokines (interleukin-6 and interleukin-12) in the progress of chronic glomerylonephritis.- Manuscript. Thesis for the scientific degree of candidate of medical sciences in speciality 14.01.37 – nephrology - SD „Institute of Nephrology of AMS of Ukraine”, Kyiv, 2008. The thesis is devoted to problems of investigation of role of cytokines (interleukin-6 and interleukin-12) and prognosis of pace of the progress of chronic glomerylonephritis in different stages of chronic kidney diseases. The indicators of interleukin-6 and interleukin-12 have been compared with the functional state of kidneys. The cytokine factor of risk of the progress of chronic glomerylonephritis has been determined on reason of appreciation of clinical, laboratory, and morphological peculiarities of glomerylonephritis. The level of interleukin-12 in plasma of blood significantly increased at III stage of chronic kidney disease, IV stage of chronic kidney disease, V stage of chronic kidney disease of chronic glomerylonephritis. It corresponds to paces of the progress fibroblastic, sclerotic processes. The level of interleukin-6 in plasma of blood moderately increased at III stage of chronic kidney disease and decreased later. It reflects the activity of inflammation of acute faze of glomerylonephritis. The level of interleukin-12 and interleukin-6 increased more significantly in patients with arterial hypertension and nephritic syndrome. The correlation has been determined between cytokines, such as interleukin-6 and interleukin-12, and different factors of the progression of chronic glomerylonephritis (arterial hypertension, proteinuria, creatininemia, glomerular filtration). Key words: chronic kidney disease, chronic glomerylonephritis, cytokines, interleukin-6, interleukin-12. ПЕРЕЛІК УМОВНИХ СКОРОЧЕНЬ АГ артеріальна гіпертензія АТ артеріальний тиск ІЛ-6 інтерлейкін-6 ІЛ-12 інтерлейкін-12 ІСС ізольований сечовий синдром НС нефротичний синдром САГ синдром артеріальної гіпертензії ШКФ швидкість клубочкової фільтрації ХГН хронічний гломерулонефрит ХНН хронічна ниркова недостатність ХХН хронічна хвороба нирок

Похожие записи