.

No-залежні процеси в печінці та їх зв’язок з моноцитарно-ендотеліальними асоціаціями при хронічній гіперімунокомплексемії (автореферат)

Язык: украинский
Формат: реферат
Тип документа: Word Doc
0 2905
Скачать документ

Міністерство охорони здоров’я України

Тернопільський державний медичний університет

імені І.Я. Горбачевського

КАЧМАРСЬКА МАРТА ОЛЕГІВНА

УДК: 616-092.19-008.61:(616.13/.16-018.74+616.155.33)

No-залежні процеси в печінці та їх зв’язок з моноцитарно-ендотеліальними
асоціаціями при хронічній гіперімунокомплексемії

14.03.04 – Патологічна фізіологія

Автореферат

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата медичних наук

Тернопіль – 2005

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана у Львівському національному медичному університеті

імені Данила Галицького МОЗ України

Науковий керівник: доктор медичних наук, професор Бідюк Мартин Миколайо-
вич, Львівський національний медичний університет імені Данила
Галицького МОЗ України, завідувач кафедри патологічної фізіології.

Офіційні опоненти:

доктор медичних наук, професор Гоженко Анатолій Іванович, Одеський
державний медичний університет МОЗ України, завідувач кафедри загальної
і клінічної патофізіології

доктор медичних наук, старший науковий співробітник Коляда Тетяна
Іванівна, Харківський науково-дослідний інститут мікробіології та
імунології імені І.І.Мечнікова АМН України, завідувач відділу імунології

Провідна установа: Інститут фізіології імені О.О.Богомольця НАН України
(відділ імунології та цитотоксичних сироваток), м.Київ

Захист відбудеться 30 вересня 2005 р. о 12 годині на засіданні
спеціалізованої вченої ради Д 58.601.01 у Тернопільському державному
медичному університеті імені І.Я. Горбачевського МОЗ України (46001, м.
Тернопіль, Майдан Волі, 1)

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Тернопільського державного
медичного університету ім. І.Я. Горбачевського МОЗ України (46001, м.
Тернопіль, вул. Руська, 12)

Автореферат розісланий 27 серпня 2005 р.

Вчений секретар спеціалізованої вченої ради

доктор медичних наук, професор
Я.Я.Боднар

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. В умовах сьогоднішньої гіпералергізації населення і
дедалі ширшого розповсюдження аутоімунних захворювань, одним із важливих
і мало досліджених аспектів сучасної імунопатології та алергології є
вивчення імунокомплексного ураження організму. На даний час вивчення
хвороб, в основі розвитку яких лежить патогенна дія імунних комплексів,
привертає увагу багатьох дослідників. Показано роль імунних комплексів і
нейтрофілів у формуванні судинно-запальних процесів, їх участь в
пошкодженні ендотеліальних клітин (Wilson C., Dixon F., 1976; Бідюк М.
та ін., 1997; Возіанова Ж.І. та ін., 2000; Shushakova N. et al., 2002;
Goedvolk C.A. et al., 2003; Kari J.A., 2003; Nakajama A. et al., 2003;
Suzuki Y. et al., 2003). Взаємодія клітин крові і судинної стінки є
початковим і дуже важливим фактором розвитку патологічних процесів, в
основі яких лежать імунокомплексні механізми, (Ройт А., Бростофф Дж.
Мейл Д., 2000; Долгих В.Т., 2001) і активну роль при цьому відіграє
система оксиду азоту і циклічних нуклеотидів (Коцюруба А.В. та ін.,
2000).

Важливим фактором елімінації циркулюючих імунних комплексів є фагоцитоз,
коли імунні комплекси, активуючи комплемент, приєднують компоненти
комплементу і фагоцитуються мононуклеарними клітинами (Дранник Г.Н.,
1999, Ройт А., Бростофф Дж. Мейл Д., 2000). Одним з основних ефекторних
органів мононуклеарної системи, яка захоплює і елімінує імунні
комплекси, є печінка (Ройт А., Бростофф Дж. Мейл Д., 2000). Враховуючи
те, що печінка є кліренсним органом і має досить розвинену судинну
сітку, то питання впливу хронічної гіперімунокомплексемії на її
морфофункціональний стан є важливим. Особливу увагу при вивченні цього
питання привертає обмін L-аргініну, а саме NO-залежні механізми його
метаболізму, оскільки оксид азоту є активатором фагоцитозу (Виноградов
Н.А., 1998; Бондаренко В.М. та ін., 1999; Гоженко А.И. и др., 2001;
Братусь В.В., 2003; Bogdan C., 1997). На сьогодні відомо, що молекула
оксиду азоту володіє широким спектром біорегуляторної дії і
опосередковує такі фундаментальні процеси організму, як міжклітинна
комунікація, нейротрансмісія, вазодилятація (Малышев И.Ю.,1997; Манухина
Е.Б., Малышев И.Ю., 2000; Реутов В.П., 2000; Krukoff T.L., 1999;
Alderton W.K. et al., 2001). В той же час роль циркулюючих імунних
комплексів в порушенні NO-синтазних процесів печінки і механізми
взаємозв`язку цих порушень з активністю моноцитів і ендотеліоцитів не
досліджені.

Незважаючи на наукові розробки, які ведуться в цьому плані, роль
первинних циркулюючих імунних комплексів у порушенні NO–синтазних
процесів печінки, а також механізми взаємозв’язку цих порушень з
функціональною активністю моноцитів та ендотеліоцитів не вивчені.
Проблема патогенетичної імунокорекції та профілактики розвитку
імунокомплексних захворювань ще далека від задовільного вирішення. Це
пояснюється складністю та недостатньо вивченими механізмами
імунокомплексних процесів. В цьому плані інтерес викликає кверцетин –
біофлавоноїд, який володіє протизапальним, антиоксидантним,
імуномодулюючим, спазмолітичним, вазодилятаторним, анаболічним,
антитоксичним, противірусним ефектами (Ковалев В.Б. и др., 1999;
Вередина Е.Г., 2001; Мойбенко О.О. та ін., 2003; Тутельян В.А. и др.,
2003; Ananth Sekher Pannala et al., 2001).

Таким чином, вивчення гепато-моноцитарно-ендотеліальних асоціацій
NO-залежних процесів за умов хронічної гіперімунокомплексемії і можливих
шляхів їх фармакокорекції і заслуговує експериментальних і клінічних
розробок.

Зв’язок роботи з програмами, планами, темами: Дисертаційна робота є
фрагментом планової наукової міжкафедральної теми
“Імуно-нейтрофільно-ендотеліально-епітеліально залежні механізми в
розвитку гіперімунокомплексного синдрому в експерименті і клініці та
підходи до їх корекції”, яка виконується на кафедрах патологічної
фізіології та клінічної імунології і алергології Львівського
національного медичного університету імені Данила Галицького (№
державної реєстрації 0101U00933), у ході виконання якої автором
самостійно проведені дослідження ролі NO-залежних механізмів печінки,
моноцитів та ендотеліоцитів у розвитку хронічної гіперімунокомплексемії
на моделі хронічної сироваткової хвороби та вивчення впливу на ці
механізми парентеральної форми кверцетину – корвітину. В цих же умовах
експерименту вивчено електронно-мікроскопічні зміни у тканині печінки,
моноцитах і ендотеліоцитах і досліджено можливість корекції виявлених
функціонально-морфологічних порушень корвітином. Тема дисертації
затверджена Проблемною комісією “Патологічна фізіологія та імунологія”
17 квітня 2003 року (протокол № 26).

Мета роботи. Вивчити гепато-моноцитарно-ендотеліальні асоціації
NO–залежних процесів за умов хронічної гіперімунокомплексемії і
патогенетичні шляхи їх фармакокорекції корвітином.

Завдання дослідження:

Вивчити активність синтаз оксиду азоту (конститутивної та індуцибельної)
у тканині печінки, моноцитах та ендотеліоцитах інтактних тварин та за
умов хронічної гіперімунокомплексемії.

Дослідити вміст стабільних метаболітів оксиду азоту – нітрит-аніону і
нітрат-аніону у тканині печінки, моноцитах та ендотеліоцитах інтактних
тварин та за умов хронічної гіперімунокомплексемії.

Встановити вміст циклічних пуринових нуклеотидів – циклічного
аденозин-3/,5/-монофосфату і циклічного гуанозин-3/,5/-монофосфату в
тканині печінки, моноцитах та ендотеліоцитах інтактних тварин та за умов
хронічної гіперімунокомплексемії.

Провести електронномікроскопічні дослідження тканин печінки, моноцитів
та ендотеліоцитів інтактних тварин та за умов хронічної
гіперімунокомплексемії.

Дослідити можливість корекції виявлених функціонально-морфологічних
порушень корвітином.

Об’єкт дослідження – хронічний гіперімунокомплексний процес, відтворений
у білих лабораторних щурів із використанням моделі хронічної
сироваткової хвороби.

Предмет дослідження – показники системи оксиду азоту і циклічних
нуклеотидів тканини печінки, моноцитів, ендотеліоцитів інтактних тварин,
тварин з хронічним гіперімунокомплексним процесом та при введенні цим
тваринам корвітину.

Методи дослідження:

З метою визначення циркулюючих імунних комплексів різних розмірів і
гемолітичної активності комплементу застосовано імунологічні методи
дослідження.

З метою визначення активності синтаз оксиду азоту, рівня стабільних
метаболітів оксиду азоту та вмісту циклічних нуклеотидів застосовано
біохімічні методи дослідження.

З метою визначення ультраструктурних змін застосовано
електронно-мікроскопічне дослідження тканин печінки, моноцитів та
ендотеліоцитів.

Наукова новизна одержаних результатів. На підставі проведених
експериментальних досліджень вперше показана роль системи оксиду азоту і
циклічних нуклеотидів у розвитку хронічної гіперімунокомплексемії.
Вперше виявлено зміни активності синтаз оксиду азоту, вмісту стабільних
метаболітів оксиду азоту та циклічних нуклеотидів у тканині печінки,
моноцитах і ендотеліоцитах за умов даної патології. Вперше виявлені
ультраструктурні зміни у тканині печінки, моноцитах та ендотеліоцитах
при хронічній гіперімунокомплексемії. Вперше встановлено, що ці зміни
корелюють із показниками системи оксиду азоту та циклічних нуклеотидів.
Вперше патогенетично обгрунтована доцільність використання корвітину для
корекції порушень при імунокомплексній патології.

Практичне значення одержаних результатів. Результати проведених
досліджень розкривають раніше невідомі механізми патофізіологічних змін
у печінці, моноцитах і ендотеліоцитах за умов хронічної
гіперімунокомплексемії та поглиблюють уявлення про патогенез
імунокомплексної патології. Отримані дані дозволяють оцінити участь в
цих процесах системи оксиду азоту і циклічних нуклеотидів та
обгрунтовують доцільність методичних розробок для застосування корвітину
в терапії імунокомплексних захворювань. Положення і висновки роботи
впроваджені в навчальний процес і використовуються при читанні лекцій та
на практичних заняттях кафедр патологічної фізіології Дніпропетровської
державної медичної академії, Тернопільського державного медичного
університету імені І.Я.Горбачевського, Буковинського державного
медичного університету, на кафедрі нормальної і патологічної фізіології
медичного факультету Сумського державного університету, на кафедрах
патологічної анатомії Львівського національного медичного університету
імені Данила Галицького, Тернопільського державного медичного
університету імені І.Я.Горбачевського, на кафедрі фармакології
Буковинського державного медичного університету, що підтверджено
відповідними актами впровадження.

Особистий внесок здобувача: Автором виконано патентно-інформаційний
пошук та обгрунтування напрямку досліджень. На основі проведеного
літературного огляду автором визначено мету і задачі дослідження,
методичні підходи, вибрано і відпрацьовано адекватні моделі і методики.
Самостійно проведено всю експериментальну частину роботи, статистичну
обробку отриманих результатів, їх аналіз та підготовку до публікацій.
Електронно-мікроскопічні дослідження проводились за консультативної
допомоги кандидата біологічних наук В.І.Ковалишина. Висновки та
практичні рекомендації сформульовано сумісно з науковим керівником.
Фактичний матеріал і основний творчий доробок в опублікованих наукових
працях у співавторстві, а також в актах впровадження, що стосуються
науково-практичної новизни, належать здобувачу.

Апробація результатів дисертації: Основні положення дисертаційної роботи
оприлюднені на IV національному конгресі патофізіологів України
(Чернівці, 2004), на установчому з’їзді Українського товариства
клітинної біології (Львів, 2004), на Х конгресі Світової Федерації
Українських Лікарських Товариств (Чернівці, 2004), на V міжнародній
конференції студентів і молодих вчених “Молодь – медицині майбутнього”
(Дніпропетровськ, 2004), на конференції “Стан і перспективи розвитку
медичної генетики, алергології та клінічної імунопатології” (Трускавець,
2005). Результати дисертаційної роботи доповідались також на спільному
засіданні Львівської обласної філії наукового медичного товариства
патофізіологів і кафедр патологічної фізіології та клінічної імунології
і алергології Львівського національного медичного університету імені
Данила Галицького (Львів, 2005).

Публікаціїї. Опубліковано 8 наукових праць, з яких 3 – у фахових
наукових виданнях та 5 – у матеріалах і збірниках конгресів та
конференцій.

Структура дисертації. Дисертацію викладено на 154 сторінках
машинописного тексту, ілюстровано 33 рисунками та 25 таблицями. Робота
складається із списку скорочень, вступу, огляду літератури, розділів
описання матеріалів і методів дослідження, результатів дослідження,
аналізу і узагальнення результатів, висновків, списку використаних
джерел, що нараховує 293 найменування, додатків. Бібліографічний опис
літературних джерел, ілюстрації та додатки викладені на 43 сторінках.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Матеріали та методи досліджень. Експерименти проведені на самцях
безпородних білих щурів, масою 200-250г, яких утримували в
індивідуальних клітках на стандартному раціоні віварію, в осінню пору
року. Експерименти на тваринах проводили у відповідності до Європейської
конвенції про захист хребетних тварин, які використовуються для
експериментальних та наукових цілей (Страсбург, 1986). Комісією
Львівського національного медичного університету імені Данила Галицького
(протокол №8 від 15.12.2004р.) порушень вимог біоетики при проведенні
експериментальних досліджень не виявлено. Всього використано 180 тварин.
Всі експериментальні тварини були поділені на 4 групи:

I група – інтактні тварини, які отримували плацебо і служили контролем –
45 тварин.

II група – інтактні тварини, яким вводили розчин корвітину – 45 тварин.

III група – тварини з хронічним гіперімунокомплексним процесом, яким
вводили плацебо – 45 тварин.

IV група – тварини з хронічним гіперімунокомплексним процесом, яким
вводили розчин корвітину – 45 тварин.

Тест-об’єктами досліджень служили тканина печінки, моноцити та
ендотеліоцити аорти. В усіх групах проведені дослідження показників
системи оксиду азоту і циклічних нуклеотидів. Паралельно, в аналогічних
умовах, вивчались методом електронної мікроскопії ультраструктурні зміни
у тканині печінки, моноцитах і ендотеліоцитах аорти на предмет виявлення
функціонально-морфологічних взаємозв’язків з наступною їх корекцією
корвітином.

В даній роботі нами використана класична модель хронічного
гіперімунокомплексного процесу запропонована (Cochrane C., Koffer D.,
1973) у модифікації (Willson C. et al , 1976). Оскільки для цього
патологічного процесу є характерним збільшення рівня циркулюючих імунних
комплексів, за їх рівнем у сироватці крові оцінювали ступінь розвитку
хвороби.

Протягом експерименту проводили забір крові для визначення рівня
циркулюючих імунних комплексів (Haskova V. et al., 1977) і
комплементарної активності (Лаповець Л.Є., Луцик Б.Д., 2002) та
виділення моноцитів шляхом центрифугування в градієнті щільності
фікол-верографін (Мазуров Д.В. та ін., 2001). Виділення ендотеліальних
клітин з аорти проводили за допомогою ферментативного диспергування
(КоваленкоТ.М. та ін., 1999).

У тканині печінки, моноцитах і ендотеліоцитах визначали показники
системи оксиду азоту [активність індуцибельної (iNOS), конститутивної
(cNOS) синтаз оксиду азоту та вміст cтабільних метаболітів оксиду азоту
– нітрит- та нітрат-аніону (NO2Їта NO3Ї)] і системи циклічних
нуклеотидів [рівень циклічного аденозин-3/,5/-монофосфату (цАМФ) та
циклічного гуанозин-3/,5/-монофосфату (цГМФ)]. Для визначення активності
NOS використовували класичний метод (Selter M. et al., 1991),
пристосований для спектрофотометричного вимірювання продуктів реакції –
нітрит-аніона (Коцюруба А.В. та ін., 2000). Вміст нітрат-аніону
визначали за методом (Bank N.R et al., 1993). Активність NOS
представляли у пікомолях NO2Ї, що утворювався за 1 хв на 1 мг загального
білку проби, вміст NO2Ї у пікомолях на 1 мг білка, NO3Ї у наномолях на 1
мг білку. Вміст загального білку у пробах визначали загальновживаним
методом Бредфорда (Bradford M., 1976). Вміст циклічних нуклеотидів
визначали за допомогою стандартного набору реактивів [(3H)-cAMP RIA kit]
і представляли у фмолях на 1 мг білку.

При проведенні досліджень застосовували корвітин, розроблений в Україні
(Київська медична академія післядипломної освіти ім.П.Л.Шупика та
Інститут фізіології ім. О.О.Богомольця) і освоєний Борщагівським
фармацевтичним заводом.

Статистичний аналіз отриманих даних проводився за допомогою методу
варіаційної статистики (Лапич С.Н. и др., 2000) з використанням
t-критерію Стьюдента для оцінки вірогідності відмінностей груп даних.
Статистично вірогідними вважалися результати, для яких Р??A 8 >

n

p

r

t

v

x

@

&-&
&”&b(p(r(t(v(x(?(?(?(?( (c(¦(uena*EAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEA
eEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeEAeE*1/2*1/2*1/2*1/2*1/2*1/2*1/2*1/2*1/2*
1/2*

@

??????набухання і вакуолізація мітохондрій, що вміщують дезорганізовані
кристи, значну кількість аутофаголізосом, мікроміхурців. Спостерігається
набухання ядерної мембрани досліджуваних клітин із втратою її
цілісності.

При дослідженні черевного відділу аорти тварин з ХГІК, встановлено, що
внутрішній шар аорти модельних тварин в ряді місць був
деендотелізований, на значних його ділянках представлений сплощеної
форми дезорганізованими клітинами, плазматична мембрана яких була часто
перервною та вміщувала дрібні депозити. Отримані дані свідчать про
глибокі пошкодження та вказують на значні альтеративні впливи, що
ініційовані хронічною гіперімунокомплексемією. Такі альтеруючі впливи на
окремі ділянки внутрішньої оболонки приводять аж до некрозу та
десквамації ендотеліальних клітин у просвіт артерії. Виявлена нами
присутність депозитів у плазматичній мембрані пошкоджених ендотеліальних
клітин може свідчити про патогенну дію імунних комплексів, які
утворюються у великій кількості за умов довготривалого введення бичачого
сироваткового альбуміну (БСА).

Питання терапії хронічного гіперімунокомплексного процесу є досить
складним і суперечливим. Ми в експерименті намагались оцінити вплив на
цей процес корвітину.

Вивчення впливу корвітину на імунологічні показники інтактних тварин
показало, що даний препарат знижує рівні ЦІК усіх розмірів, особливо
великих і малих, та показник гемолітичної активності сироватки крові, що
свідчить про посилення елімінації ЦІК з кровоплину фагоцитуючими
клітинами.

При дослідженні показників системи оксиду азоту за цих умов виявлено, що
у тканині печінки і моноцитах достовірно підвищується активність сNOS, в
ендотеліоцитах спостерігається лише тенденція до її підвищення.
Паралельно з цим у тканині печінки відмічено достовірне підвищення
вмісту NO3Ї. Частка NO2Ї у печінці та ендотеліоцитах у загальній сумі
метаболітів зменшується. Це свідчить, що корвітин стимулює активність
конститутивної ізоформи NO-синтази і підвищує продукцію нітрат-аніону у
печінці, які забезпечують протікання фізіологічних функцій (Ванин А.Ф.,
2000, Ивашкин В.Т., Драпкина О.М., 2000, Alderton W.K. et al., 2001).

Змін у вмісті ЦН у досліджуваних тест-об’єктах при введенні корвітину
інтактним тваринам не виявлено, за винятком рівня цАМФ у моноцитах, який
зріс у 1,6 рази (Р0,05) і
концентраціїї циклічних нуклеотидів (Р>0,05) .

Нормалізація імунологічних і біохімічних показників при застосуванні
корвітину у тварин з хронічною гіперімунокомплексемією супроводжується
позитивними змінами ультраструктури досліджуваних тест-об’єктів.
Відновлюється оптимальний стан клітинних і неклітинних структур
синусоїдних гемокапілярів. Спостерігається нормалізація ультраструктури
моноцитів і ендотеліоцитів з відновленням цитоплазматичних і ядерних
мембран.

ПЕРЕЛІК ПУБЛІКАЦІЙ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

Качмарська М.О., Бідюк М.М., Чоп’як В.В., Ковалишин В.І.
Ультраструктурна організація тканин печінки за умов хронічної
гіперімунокомплексемії в експерименті // Вісник наукових досліджень. –
2003. – №3. – С.74-77. (Автор приймала участь у
електронно-мікроскопічних дослідженнях, самостійно проаналізовано та
узагальнено виявлені зміни, написано статтю).

Качмарська М.О., Чоп’як В.В., Ковалишин В.І., Садляк О.В., Вальчук І.В.
Вплив корвітину на ультраструктури синусоїдних гемокапілярів печінки
білих щурів за умов хронічного гіперімунокомплексного процесу //
Клінічна та експериментальна патологія. – 2004. – Т.ІІІ, №2. –
С.363-365. (Автор приймала участь у електронно-мікроскопічних
дослідженнях, самостійно проаналізовано та узагальнено виявлені зміни,
написано статтю).

Качмарська М.О., Бідюк М.М., Чоп’як В.В., Ковалишин В.І.
Експериментальна корекція хро-нічного гіперімунокомплексного процесу //
Вісник наукових досліджень. – 2004. – №3. – С.125-128. (Автор приймала
участь у електронно-мікроскопічних дослідженнях, самостійно
проаналізовано та узагальнено виявлені зміни, написано статтю).

Бідюк М., Чоп’як В., Любінець Л., Качмарська М. Хронічний
гіперімунокомплексний процес та регуляція синтезу оксиду азоту //
Актуальні проблеми клінічної імунології та алергології. – 1998. – №2. –
С.21-30. (Автором самостійно проведено дослідження вмісту нітрит-аніону
і циклічних нуклеотидів у тканині печінки тварин з хронічним
гіперімунокомплексним процесом, здійснено аналіз літературних джерел,
проаналізовано та узагальнено виявлені зміни).

Бідюк М.М., Чоп’як В.В., Качмарська М.О., Любінець Л.А., Никитюк Г.П.
Обмін L-аргініну за умов хронічної гіперімунокомплексемії
//Фізіологічний журнал – 2000. – Т.46, №2. – С.50-51. (Автором
самостійно проведено дослідження вмісту оксиду азоту у тканині печінки
тварин з хронічним гіперімунокомплексним процесом, проаналізовано та
узагальнено виявлені зміни).

Качмарська М.О., Бідюк М.М., Чоп’як В.В., Любінець Л.А. Продукція оксиду
азоту моноцитами білих щурів з імунокомплексною патологією // Тези
доповідей Установчого з’їзду Українського товариства клітинної
біології. – Львів, 2004. – С.288. (Автором самостійно проведено
дослідження показників системи оксиду азоту у моноцитах тварин з
хронічним гіперімунокомплексним процесом, проаналізовано та узагальнено
виявлені зміни, написано тези).

Качмарська М.О. Вплив корвітину на NO-синтазну активність печінки за
умов хронічного гіперімунокомплексного процесу в експерименті // Тези
доповідей Х конгреу СФУЛТ. – Чернівці, 2004. – С.388.

Качмарська М. Стан системи циклічних нуклеотидів в моноцитах за умов
хронічної гіперімунокомплексемії // Тези доповідей V міжнародної
конференції студентів і молодих вчених “Молодь – медицині майбутнього”.
– Дніпропетровськ. – 2004. – С.18-19.

АНОТАЦІЯ

Качмарська М.О. NO-залежні процеси у печінці та їх зв’язок з
моноцитарно-ендотеліальними асоціаціями при хронічній
гіперімунокомплексемії. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за
спеціальністю 14.03.04 – патологічна фізіологія. – Тернопільський
державний медичний університет імені І.Я.Горбачевського МОЗ України.
Тернопіль, 2005.

Дисертаційна робота присвячена вивченню
гепато-моноцитарно-ендотеліальних асоціацій NO–залежних процесів за умов
хронічної гіперімунокомплексемії і патогенетичних шляхів їх
фармакокорекції корвітином. В експериментах на білих щурах-самцях
досліджено показники системи оксиду азоту (активність iNOS, cNOS, вміст
NO2Ї і NO3Ї) та циклічних нуклеотидів (цАМФ і цГМФ) у печінці, моноцитах
та ендотеліоцитах за умов хронічної гіперімунокомплексемії (ХГІК) та її
корекції корвітином. Паралельно за даних умов вивчено ультраструктурні
зміни досліджуваних тест-об’єктів.

За отриманими даними при ХГІК спостерігається активація iNOS та
пригнічення сNOS в печінці, моноцитах і ендотеліоцитах. Одночасно з цим
відмічено зниження суми стабільних метаболітів – NO2Ї і NO3Ї та рівнів
цАМФ і цГМФ в усіх досліджуваних тест-об’єктах. Підвищення активності
iNOS супроводжувалось деструктивними змінами у тканині печінки,
моноцитах та ендотеліоцитах. Ці дані свідчать про участь активації iNOS
у розвитку порушень при хронічній гіперімунокомплексемії. Застосування
корвітину при ХГІК нормалізує у досліджуваних тест-об’єктах систему NO
за рахунок зниження активності iNOS і підвищення – cNOS. Одночасно
нормалізується вміст NO3Ї у печінці і моноцитах та NO2Ї в
ендотеліоцитах. З боку NO2Ї у печінці і моноцитах спостерігається
тенденція до нормалізації. Рівень NO3Ї у ендотеліоцитах підвищується.
Відмічено нормалізацію вмісту циклічних нуклеотидів. Введення корвітину
супроводжувались позитивними змінами і ультраструктури печінки,
моноцитів та ендотеліоцитів. Таким чином, проведені експериментальні
дослідження показали, що корвітин за умов хронічної
гіперімунокомплексемії нормалізує імунологічні, біохімічні і
ультраструктурні порушення, і виявляє виявляє імуносупресивний,
протизапальний, цитопротекторний і ендотелійстабілізуючий ефекти.

Ключові слова: хронічна гіперімунокомплексемія, оксид азоту, циклічні
нуклеотиди, печінка, моноцити, ендотеліоцити, корвітин.

АННОТАЦИЯ

Качмарская М.О. NO-зависимые процессы в печени и их взаимосвязь с
моноцитарно-эндотелиальными ассоциациями при хронической
гипериммунокомплексемии. – Рукопись.

Диссертация на соискание научной степени кандидата медицинских наук по
специальности 14.03.04. – патологическая физиология. – Тернопольский
государственный медицинский университет имени И.Я. Горбачевского МЗ
Украины. Тернополь, 2005.

Диссертационная работа посвящена изучению
гепато-моноцитарно-ендотелиальних ассоциаций NO–зависимых процессов при
хронической гипериммунокомплексемии і патогенетических путей их
фармакокорекции корвитином. В экспериментах на белых крысах-самцах
изучены показатели системы оксида азота (активность синтаз оксида азота
– iNOS, сNOS, содержание стабильных метаболитов – NO2Ї и NO3Ї) и
циклических нуклеотидов (цАМФ и цГМФ) в печени, моноцитах и
эндотелиоцитах при хронической гипериммунокомплексемии и ее коррекции
корвитином. Кроме того, в аналогичных условиях изучены ультраструктурные
изменения исследуемых тест-объектов. В работе использованы
иммунологические, биохимические и электронно-микроскопические методы
исследования.

Изучение особенностей хронического гипериммунокомплексного процесса
показало, что его развитие подтверждается повышением показателей
циркулирующих иммунных комплексов и снижением гемолитической активности
сыворотки крови. Развитие данного патологического процесса обусловило
существенные изменения в системе оксида азота и циклических нуклеотидов.
Согласно полученным данным при хронической гипериммунокомплексемии
наблюдается повышение суммарной активности NOS в ткани печени. При этом
в активности ее изоформ наблюдаются разнонаправленные сдвиги: активность
iNOS возрастает, а cNOS – снижается, что обуславливает снижение
показателя их соотношения. В моноцитах и эндотелиоцитах суммарная
активность NOS не изменилась. При этом ее изоформы претерпели
существенных изменений, аналогичных к таким, как в ткани печени:
активность іNOS увеличилась, а сNOS – снизилась. При даном
патологическом процессе наблюдаются также нарушения в содержании
стабильных метаболитов NO и концентрации ЦН во всех исследуемых
тест-объектах. В ткани печени и эндотелиоцитах уровень NO2Ї і NO3Ї
снизился, снизилась и концентрация цАМФ и цГМФ. В то же время в
моноцитах содержание NO2Ї и концентрация цГМФ резко увеличились, а NO3Ї
и цАМФ – снизились. Несмотря на повышение уровня NO2Ї в моноцитах
сумарное содержание стабильных метаболитов в этих клетках при
иммунокомплексной патологии также снизилось. Это свидетельствует о том,
что в условиях развития воспалительного процесса в стенке сосудов
микроциркуляторного русла печени и аорты при хронической персистенции
циркулирущих иммунных комплексов может наблюдаться усиленное
использование NO с образованием пероксинитрита. Повышение активности
iNOS сопровождалось деструктивными изменениями в тканях печени,
моноцитах и эндотелиоцитах. Применение корвитина при смоделированом
патологическом процессе нормализует показатели системы NO в основном за
счет ингибирования активности iNOS и повышения активности сNOS.
Одновременно нормализуется содержание NO3Ї в печени и моноцитах и NO2Ї
в эндотелиоцитах. Со стороны NO2Ї в печени и моноцитах наблюдается
тенденция к нормализации. Уровень NO3Ї в эндотелиоцитах при этом
увеличивается, значительно превышая его показатели у интактных животных.
Параллельно отмечено нормализацию содержания циклических нуклеотидов.
Введение корвитина животным с хроническим гипериммунокомплексным
процессом сопровождалось положительными изменениями и ультраструктуры
печени, моноцитов и эндотелиоцитов. Наблюдается нормализация стенки
синусоидных гемокапиляров печени. Восстанавливается оптимальное
состояние клеточных и неклеточных структур синусоидных гемокапиляров.
Наблюдается нормализация ультраструктуры моноцитов и эндотелиоцитов с
восстановлением цитоплазматических и ядерных мембран. Результаты
проведеных экспериментов раскрывают ранее неизвестные механизмы
патологических изменений в печени, моноцитах и эндотелиоцитах при
хронической гипериммунокомплексемии, а также углубляют понимание
патогенеза иммунокомплексной патологии. Полученные данные позволяют
оценить участие в развитии нарушений при хронической персистенции
циркулирующих иммунных комплексов системы оксида азота и циклических
нуклеотидов. Результаты исследований свидетельствуют о том, что корвитин
нормализует показатели этих систем, проявляя противовоспалительный,
цитопротекторный и эндотелийстабилизирующий эффекты, что обосновывает
целесообразность методических разработок для применения корвитина в
терапии иммунокомплексных заболеваний.

Ключевые слова: хроническая гипериммунокомплексемия, оксид азота,
циклические нуклеотиды, печень, моноциты, эндотелиоциты, корвитин.

SUMMARY

Kachmarska M.O. NO-dependent proceses in liver and their connection with
monocytar-endotelial associations, in chronic hyperimmunocomplexemia. –
Manuscript.

The dissertation for obtaining the scientific degree of candidate of
medical sciences on speciality 14.03.04 – pathological physiology. –
Ternopil state medical university named after I.Ya. Gorbachevskyi MHP of
Ukraine. Ternopil, 2005.

The dissertation work is devoted to study of NO and cyclic nucleotides
role – in development of chronic hyperimmunocomplex process. In
experiments on white male-rates the indexes of Nitrogen oxide system
(iNOS – cNOS activity, NO2? and NO3? content) and of cyclic nucleotides
(cAMP and cGMP) – in liver, monocytes and endotheliocytes – in chronic
hyperimmunocomplexemia and its correction by corvitine. Paralelly in
these conditions the ultrastructural changes of investigated
test-objects were studied. According to the received data – in chronic
hyperimmunocomplex process observed was a considerable increase of iNOS
activity and decrease of cNOS activity. Simultaneously with revealed
changes in fermentative activity it was marked the lowering of stable
metabolites NO2? and NO3? sum, and of cAMP and cGMP levels – in all
investigated test-objects. The iNOS activity increase was accompanied by
destructive changes in tissues of liver, monocytes and endoteliocytes.
Corvitine application in the modelled pathological process – normalizes
NO system, in the investigated test-objects – mainly by means of iNOS
activity inhibition and cNOS activation. Simultaneously – NO3? content
was normalized in liver and monocytes and NO2? content was normalized in
endotheliocytes. NO3? level in endoteliocytes –is increased,
considerably prevailing this index in intact animals. There was also
marked the normalisation of content and of cyclic nucleotides. Changes
in Nitrogen oxide system and in cyclic nucleotides system, in corvitine
injection – were accompanied by positive changes of ultrastructure of
liver, monocytes and endotheliocytes. The received data testify, that
corvitine normalizes the investigated indexes, showing the
anti-inflammatory, cytoprotective and endothelium-stabilisation effects.

Key words: nitrogen oxide, cyclic nucleotides, chronic
hyperimmunocomplexemia, liver, monocytes, endotheliocytes, corvitine.

Нашли опечатку? Выделите и нажмите CTRL+Enter

Похожие документы
Обсуждение

Оставить комментарий

avatar
  Подписаться  
Уведомление о
Заказать реферат!
UkrReferat.com. Всі права захищені. 2000-2019