.

Морфо-функціональна характеристика сперматогенезу при дії деяких хімічних і фізичних чинників (автореферат)

Язык: украинский
Формат: реферат
Тип документа: Word Doc
0 2965
Скачать документ

МІНІСТЕРСТВО ОХОРОНИ ЗДОРОВ’Я УКРАЇНИ

НАЦІОНАЛЬНИЙ МЕДИЧНИЙ УНІВЕРСИТЕТ

імені О.О. БОГОМОЛЬЦЯ

Запривода Лариса Петрівна

УДК 611.013.12:57.043 /.044

Морфо-функціональна характеристика сперматогенезу при дії деяких
хімічних і фізичних чинників

14.03.09 – гістологія, цитологія, ембріологія

АВТОРЕФЕРАТ

дисертації на здобуття наукового ступеня

кандидата медичних наук

Київ – 2005

Дисертацією є рукопис.

Робота виконана в Національному медичному університеті імені

О.О. Богомольця МОЗ України.

Науковий керівник

доктор медичних наук, професор

Яценко Валентин Порфирович,

Національний технічний університет

України “КПІ” МОН України,

завідуючий кафедрою медичної

кібернетики та телемедицини.

Офіційні опоненти:

доктор медичних наук, професор Гордієнко Вадим Максимович, Київський
національний університет ім. Тараса Шевченка МОН України, професор
кафедри цитології, гістології та біології розвитку;

кандидат біологічних наук Бідна Лариса Павлівна, Національний медичний
університет імені О.О. Богомольця МОЗ України, доцент кафедри
гістології, цитології та ембріології.

Провідна установа

Тернопільський державний медичний університет ім. І.Я. Горбачевського,
кафедра гістології, цитології та ембріології, МОЗ України, м. Тернопіль.

Захист відбудеться “ 17 ” лютого 2005 р. о 1330 годині на засіданні
спеціалізованої вченої ради Д 26.003.06 у Національному медичному
університеті імені О.О. Богомольця (03057, м. Київ, пр-т Перемоги, 34).

З дисертацією можна ознайомитись у бібліотеці Національного медичного
університету імені О.О. Богомольця МОЗ України (03057, м. Київ, вул.
Зоологічна, 1).

Автореферат розісланий “ 14 ” січня 2005 р.

Вчений секретар

спеціалізованої вченої ради Д 26.003.06

доктор медичних наук, професор Грабовий О.М.

ЗАГАЛЬНА ХАРАКТЕРИСТИКА РОБОТИ

Актуальність теми. У вік техногенної агресії в полі зору дослідників
знаходиться вивчення морфо-функціонального стану сперматогенезу як
клітинної системи, постійно оновлюваної та дуже чутливої до дії
екстремальних чинників хімічної та фізичної природи, що викликане
погіршенням репродуктивного здоров’я чоловіків (Englert Y., 1998).
Останнім часом саме андрогенний фактор в більшій половині випадків
зумовлює появу безплідних шлюбів (Жиборев В.Н. и др., 1990; Гринчук
В.А., 1990; Батыров Б.Б., 1990; Артюхин А.А., 1990; Паращук Ю.С., 1994;
Іванюта Л.І., 1996).

Широке застосування в хімічній промисловості, в авто- та суднобудуванні
находять нині епоксидні смоли та композиції на їх основі завдяки
унікальному набору технологічних властивостей. Разом з тим при
виробництві епоксидних смол та склопластиків, де концентрація
епіхлоргідрину в 1,5 рази перевищувала гранично допустиму, у 40,5%
чоловіків зі стажем роботи від 1 до 10 років відмічені сексологічні
скарги (Нешков Н.С. и др., 1976; Высоцкий И.Ю., 2002).

Актуальність вивчення модельованих факторів космічного польоту
визначається загальною стратегією України щодо проведення наукових
біомедичних досліджень в космічному просторі та суперечливістю відомих
даних про вплив цих факторів на одну з найбільш ушкоджуваних систем
організму – генеративну (Плахута-Плакутина и др., 1976; Денисова Л.А. и
др., 1988; Федорова Н.Л., 1967; Philpott D.E. et al., 1985).

Використання у багатьох галузях народного господарства джерел
електромагнітного надвисокочастотного випромінювання приводить до
розвитку різноманітних патологічних процесів у обслуговуючого персоналу
та населення найближчих районів. З іншого боку, цей фізичний фактор при
певних параметрах може благотворно впливати на живі організми,
наприклад, у вигляді мікрохвильової резонансної терапії (МРТ). В
літературі є відомості про вплив електромагнітного випромінювання
промислової частоти на статеву систему, зокрема, на сперматогенез
(Дедловская В.И. и др., 1987). При цьому встановлено, що тривала дія
електромагнітного випромінювання (6 місяців) викликала пригнічення
процесу поділу сперматогоній, а також приводила до деструкції зрілих
статевих клітин.

В період зростаючої екологічної свідомості проблема збереження
репродуктивного здоров’я є досить актуальною. Передумовою для проведення
нинішнього дослідження є відсутність даних про вплив на генеративну
функцію чоловіків епоксиднодіанової смоли ЕД-22ф. У зв’язку з
суперечливістю даних про вплив факторів космічного польоту на чоловічу
репродуктивну систему та відсутністю інформації щодо дії гравітаційних
навантажень у краніо-каудальному напрямку, що мають місце в практиці
авіакосмічних польотів, постає необхідність подальшого вивчення цих
питань. Не вивчені питання впливу електромагнітного поля надвисокої
частоти низької інтенсивності на гонади та функцію відтворення при
використанні його в умовах реальних режимів сеансного випромінювання, що
застосовуються в лікувальній практиці.

Таким чином, є доцільним вивчення впливу вищеописаних чинників на стан
чоловічої генеративної системи, яка реагує на значно нижчі рівні дії
пошкоджуючих агентів, ніж інші органи і системи організму. Отримані
результати будуть враховані при обгрунтуванні санітарних стандартів, а
також профілактичних заходів, спрямованих на запобігання несприятливої
дії зазначених чинників на репродуктивне здоров’я людей.

Зв’язок роботи з науковими програмами, планами, темами. Робота виконана
у рамках комплексних науково-дослідних робіт Науково-дослідного
лабораторного центру НМУ по темах: 1. “Физические принципы диагностики и
лечения заболеваний человека с помощью низкоинтенсивных электромагнитных
полей миллиметрового диапазона”, по заказу Госкомитета СССР по науке и
технике и Президиума АН СССР от 1.07.86 №278/141, 1986-1989 гг.
2. “Моделювання (теоретичні та прикладні аспекти) захворювань людини та
розробка математичних та інформаційних технологій супроводження
медико-біологічних досліджень”, № держреєстрації 0198U003076, 1998-2000
рр. 3. “Дослідити особливості функції репродукції та пренатального
розвитку білих щурів при впливі різноспрямованої гіпергравітації”, №
держреєстрації 0198U001308, 2001-2003 рр.

Мета та задачі дослідження. Метою дослідження є експериментальне
вивчення загальних закономірностей перебігу процесу сперматогенезу в
умовах впливу чинників хімічної та фізичної природи. Досягнення цієї
мети базувалось на вирішенні наступних задач:

Систематизувати та провести порівняльний аналіз існуючих методів
морфо-функціональної оцінки сперматогенезу.

Розробити новий метод для морфометричної оцінки завершального етапу
сперматогенезу – періоду формування зрілих статевих клітин, та створити
алгоритм і програму для ЕОМ з метою його автоматизації.

Апробувати розроблений метод на моделі пошкодження гонад при хронічній
свинцевій інтоксикації та при корекції її люпином.

Провести дослідження закономірностей сперматогенезу при дії на організм
білих щурів летючого комплексу епоксиднодіанової смоли ЕД-22ф.

Вивчити механізми впливу різноспрямованої гіпергравітації на
репродуктивну функцію білих щурів.

Дослідити вплив локальної дії електромагнітного поля надвисокої частоти
(ЕМП НВЧ) на репродуктивне здоров’я білих щурів.

Об’єкти дослідження: сім’яники та клітини сперматогенного ряду, зрілі
сперматозоїди, придатки сім’яників та сім’яні пухирці дорослих самців
щурів, гіпофіз та наднирники потомків білих щурів, а також дорослі
особини обох статей та їхнє потомство.

Предмет дослідження: загальні закономірності перебігу процесу
сперматогенезу в умовах дії таких хімічних факторів, як ацетат свинцю та
епоксиднодіанова смола, а також фізичних факторів – різноспрямована
гіпергравітація та локальна дія ЕМП НВЧ.

Методи дослідження: морфологічні, морфометричні, фізіологічні,
електронномікроскопічні, токсиколого-гігієнічні, математичні,
статистичні.

Наукова новизна одержаних результатів. Вперше отримані закономірності
інгаляційної дії летючих компонентів епоксиднодіанової смоли ЕД-22ф,
різноспрямованої гіпергравітації та локального опромінення
електромагнітного поля надвисокої частоти низької інтенсивності на стан
репродуктивної функції самців білих щурів. Вперше розроблений новий
метод, який дозволяє здійснити морфометричну оцінку завершального етапу
сперматогенезу – періоду формування, і на цій основі дати кількісну
характеристику кінцевих етапів утворення зрілих статевих клітин.

Практичне значення одержаних результатів. Отримані дані про наявність
гонадотоксичного ефекту епоксиднодіанової смоли ЕД-22ф в концентрації на
рівні існуючої гранично допустимої по епіхлоргідрину представлені
науковцям гігієнічного профілю для розробки групового нормативу,
придатного для всіх застосовуваних у промисловості епоксиднодіанових
смол. Виявлений негативний вплив перевантаження на стан репродуктивної
системи експериментальних тварин, особливо виражений в
каудо-краніальному напрямку, що має місце в умовах реальних польотів, є
основою для необхідності наукового обгрунтування профілактичних заходів
для пілотів спеціалістами авіакосмічної медицини. Отримані дані щодо
стану репродуктивного здоров’я білих щурів при дії ЕМП НВЧ, яке
застосовується з лікувальною метою, були використані при впровадженні
мікрохвильової резонансної терапії в клінічну практику. Створений метод
оцінки стану сперматогенезу є теоретичною передумовою для наукового
обгрунтування санітарних стандартів, а також для розробки профілактичних
заходів, спрямованих на запобігання можливої несприятливої дії чинників
навколишнього середовища на репродуктивну функцію людини. Матеріали
роботи при впровадженні в навчальний процес розширюватимуть уявлення
студентів про вплив чинників хімічної та фізичної природи на стан
чоловічої репродуктивної системи.

Особистий внесок здобувача. Автором самостійно проведений пошук, збір і
аналітичний огляд джерел наукової літератури за темою дисертації.
Власноруч відтворена експериментальна модель пошкодження гонад при
хронічній свинцевій інтоксикації та корекції її люпином.
Експериментально-токсикологічне дослідження епоксиднодіанової смоли
ЕД-22ф проведене сумісно з співробітниками кафедри гігієни праці та
професіональних захворювань НМУ (зав. кафедрою – професор

О.П. Яворовський). Самостійно вивчене автором репродуктивне здоров’я
експериментальних тварин при дії фізичних факторів: різноспрямованої
гіпергравітації та ЕМП НВЧ. Набраний необхідний ембріональний матеріал,
отримане потомство та проведені фізіологічні дослідження його пре- та
постанатального онтогенезу. Вивчений функціональний стан сперматогенезу
у експериментальних тварин. Проведена гістологічна обробка та
морфометричний аналіз матеріалу. Електронномікроскопічні дослідження
здійснені в лабораторії електронної мікроскопії НДЛЦ при консультативній
допомозі професора Л.О. Стеченко. Автором здійснене статистичне
опрацювання, аналіз отриманих даних і написання роботи.

Планування досліджень, розробка морфометричного методу оцінки
сперматогенезу, інтерпретація наукових положень, формулювання висновків
та профілактичних рекомендацій проведені спільно з науковим керівником,
а також при консультуванні І.Г. Анісімової, провідного наукового
співробітника науково-дослідної групи токсикології НДЛЦ НМУ, де працює
дисертант.

В наукових працях, опублікованих у співавторстві, автору належить
фактичний матеріал, отриманий нею при проведенні дослідження.

Апробація результатів дисертації. Основні положення дисертації
оприлюднені на: I Міжнародному симпозіумі “Гигиена физических факторов
окружающей и производственной среды” (Київ, 1993); науково-практичних
конференціях Науково-дослідного лабораторного центру Національного
медичного університету “Актуальні проблеми експериментальної медицини”
(Київ, 1994, 1997, 1998, 1999, 2002, 2003); II Національному конгресі
анатомів, гістологів, ембріологів і топографоанатомів (Луганськ, 1998);
симпозіумі з проблем космічної біомедицини (Київ, 2000); XII конференції
з космічної біології та авіакосмічної медицини (Москва, 2002); II
науковому симпозіумі “Космічна біомедицина. Телемедицина” (Київ, 2004).

Публікації. За матеріалами дисертації опубліковано 14 наукових робіт,
які повністю відображають зміст проведеного дослідження, з них 3 –
журнальні статті в профільних фахових виданнях, рекомендованих ВАК
України, 11 – в збірниках робіт симпозіумів і наукових конференцій.
Отриманий патент від 17.03.2000 р. на “Спосіб оцінки порушень
сперматогенезу”.

Структура і об’єм дисертації. Дисертація виконана на 202 сторінках
машинописного тексту (обсяг тексту основної частини становить 127
сторінок). Дисертація складається із вступу, огляду літератури, розділу
“Програма, об’єм та методи дослідження”, розділу власних досліджень,
аналізу та узагальнення результатів дослідження, висновків, списку
використаних джерел, який включає 283 бібліографічні описи, серед яких
235 робіт авторів України та країн СНД, 48 робіт іноземних авторів.
Робота проілюстрована 27 таблицями, 57 рисунками.

ОСНОВНИЙ ЗМІСТ РОБОТИ

Матеріали і методи дослідження. Експерименти по вивченню впливу чинників
хімічної та фізичної природи на репродуктивну функцію самців білих щурів
сплановані у відповідності до існуючих методичних рекомендацій та
методичних вказівок (1978, 1988, 2000). При цьому проводили
макроскопічне дослідження сім’яників, яке включало зовнішній огляд з
метою виявлення патологічних відхилень, вимірювання розміру та маси обох
сім’яників, відношення маси сім’яників до маси тіла; а також визначали
масу та масові коефіцієнти придатків сім’яників та сім’яних пухирців.

Функціональний стан сперматозоїдів оцінювали за тривалістю збереження їх
рухливості (Егорова Г.М. и др., 1966), осмотичною резистентністю
(Милованов В.К., 1962), відносною кількістю нерухомих та патологічних
форм (Саноцкий И.В. и др., 1970).

Для мікроскопічного дослідження сім’яники фіксували в рідині Карнуа,
занурювали в парафін, готували тонкі зрізи (6-7 ?), забарвлювали
гематоксиліном і еозином. Препарати тонких зрізів фотографували за
допомогою цифрової фотокамери та мікроскопу “Олімпус”. На гістологічних
препаратах підраховували ряд морфометричних показників: індекс
сперматогенезу за чотирибальною системою Fogg (1951), кількість
нормальних сперматогоній (Щербаков Г.Г., 1974), відносне число канальців
зі злущеними клітинами сперматогенного ряду та 12-ю стадією мейозу
(Саноцкий И.В. и др., 1979).

Для морфометричної оцінки завершального етапу сперматогенезу – періоду
формування, нами був розроблений новий метод, за допомогою якого не
тільки констатується факт наявності певної кількості сперматогенних
клітин, але також характеризується процес сперматогенезу в розвитку
шляхом визначення показника ступеня диференціації сперматид (ПСДС) –
співвідношення середньої кількості сперматид в одиниці площі зрізу
звивистих сім’яних канальців на VIа і IXа стадіях сперматогенезу за
класифікацією C.P. Leblond et al. (1952). Практичну реалізацію
запропонованого підходу здійснюють наступним чином. На поперечних зрізах
сім’яників досліджують по 5 канальців на стадіях VIа і IXа
сперматогенезу. Проводять виміри зовнішнього діаметра канальця (Д) і
діаметра просвіту (d). Потім в стандартній площі поля зору, яке включає
всю товщу сперматогенних клітин, підраховують кількість сперматид (Р).
Для кожного досліджуваного канальця такий підрахунок здійснюють у
чотирьох полях зору. Таким чином в кожному препараті, що вивчається,
проводять підрахунок числа сперматид в 20 полях зору. Визначення ПСДС
здійснюють за розробленою комп’ютерною програмою.

Розроблений нами метод для оцінки стану сперматогенезу був апробований
на моделі пошкодження гонад при свинцевій інтоксикації (Чарыев О.Г. и
др., 1977; Красовский Г.Н. и др., 1984) та при корекції її люпином –
трав’янистою рослиною родини бобових, зокрема, білого люпину (Lupinus
albus) сорту “Олешко”, наданого нам Українською асоціацією “Люпин і
біб”. Для цього самцям білих щурів на протязі всього процесу
сперматогенезу (56 днів) внутрішньошлунково вводили ацетат свинцю в
токсичній (0,05 мг/кг маси тіла) та недіючій за загальнотоксичними
показниками (0,0015 мг/кг) дозах. По закінченні експерименту частині
щурів, які одержували ацетат свинцю в токсичній дозі, з метою корекції
пошкоджених гонад протягом 1 місяця щоденно добавляли до добового
раціону 5 г люпинового борошна, яке вміщувало 0,21 мг Zn. B експерименті
використано 40 самців щурів, розподілених на 4 групи: I група –
контроль, II і III група включали самців, які піддавалися
внутрішньошлунковому введенню ацетату свинцю в дозі 0,05 мг/кг, IV група
– в дозі 0,0015 мг/кг. Десять самців III групи з моделлю пошкодження
гонад піддавали люпиновій корекції.

Експерименти по вивченню гонадотоксичної дії епоксиднодіанової смоли
ЕД-22ф проведені на 24 статевозрілих щурах-самцях, яких на протязі 4-х
місяців 5 раз в тиждень по 4 години в день піддавали дії летючого
комплексу в концентрації 0,92±0,07 мг/м3 – на рівні існуючої гранично
допустимої концентрації по епіхлоргідрину. Контроль за концентрацією
летючого комплексу в затравочній камері проводили за провідним
компонентом – епіхлоргідрином (Перегуд Е.П. и др., 1973).

Модель гіпергравітації здійснювали на центрифузі типу К26Д з радіусом
ротора 23 см. Щурів розміщували в пластмасових камерах у двох напрямках
– голова-таз та таз-голова. Гравітаційному навантаженню величиною 4g
щури піддавалися на протязі 7 днів по 3 години щоденно. B експерименті
використано 24 самці щурів, розподілених на 3 групи:

I група – контроль, II група – дослідні самці щурів, які піддавалися
гравітаційним навантаженням у краніо-каудальному напрямку, III група –
дослідні самці щурів, які піддавалися гравітаційним навантаженням у
каудо-краніальному напрямку. В експериментальних тварин проводили
дослідження макрометричних показників репродуктивних органів та
морфо-функціонального стану сперматогенезу. З метою інтегральної оцінки
функції відтворення потомства самців білих щурів контрольної та
дослідних груп парували з 65 інтактними самицями. Було отримано 48
запліднених самиць, з яких вагітними виявилися 38. При цьому обчислювали
показники функції репродукції самців – індекси плодючості та вагітності.

Локальну дію електромагнітного поля надвисокої частоти (ЕМП НВЧ)
здійснювали генератором ГЧ-142 через біологічно активну точку (БАТ)
цзу-сань-лі (Плахотин М.В., 1966). Частота випромінювання складала 59
ГГц, вид випромінювання – неперервний синусоїдальний сигнал, густина
потоку енергії на виході хвилевода 1 мВт/см2, експозиція 15 хвилин.

В першій серії цього експерименту вивчали вплив випромінювання на
репродуктивну функцію дорослих самців білих щурів, для чого їх піддавали
дії ЕМП НВЧ на протязі 56 днів. Потім самців парували з інтактними
самицями для отримання ембріонального матеріалу та потомства. Відразу
після парування тварин виводили з експерименту, вивчаючи при цьому
морфо-функціональний стан сім’яників.

В другій серії експерименту визначали показники пре- і постнатального
розвитку та морфо-функціонального стану сперматогенезу потомства самиць,
які піддавалися дії ЕМП НВЧ в різні періоди життя (до парування та під
час вагітності). Частину самиць опромінювали на протязі 3-х естральних
циклів (15 днів), після чого їх парували з інтактними самцями. Іншу
частину самиць опромінювали в різні строки вагітності: 1-6 та 6-16 дні.

Від вагітних самиць отримували ембріональний матеріал з метою вивчення
рівня пренатальної загибелі зародків та загального розвитку плодів.

Частину вагітних щурів доводили до пологів, реєструючи у потомства
показники фізичного розвитку, швидкість дозрівання сенсорно-рухових
рефлексів, емоційно-рухову поведінку та здатність до координації рухів.
По досягненні статевої зрілості у потомків чоловічої статі дослідної та
контрольних груп вивчали морфо-функціональний стан сперматогенезу.

Ультраструктурне дослідження сім’яників гіпофізу та наднирників було
проведене у 20 щуренят від 20-ти самиць, опромінених у 1-6 та 6-16 дні
вагітності.

Всього при вивченні репродуктивного здоров’я білих щурів, опромінених
ЕМП НВЧ, було задіяно 120 дорослих самців щурів, досліджено естральний
цикл з метою відбору правильно циклюючих самиць у 587 тварин, отримано
218 вагітних самиць, обстежено 1570 плодів та 588 щуренят.

Матеріалом для електронномікроскопічного дослідження служили шматочки
сім’яників, аденогіпофізу та наднирників тварин. Шматочки подрібненого
матеріалу фіксували 2% розчином OsO4 за Caulfild (1957) на протязі 2
год. при +4oС. Шматочки аденогіпофізу попередньо фіксували на протязі 1
год. глютаровим альдегідом на фосфатному буфері з наступною 2-х годинною
дофіксацією в 2% OsO4 за Millonig. Після фіксації зневоднювали в етанолі
зростаючої концентрації, в ацетоні і заливали в суміш аралдиту та епону
за загальноприйнятою схемою (Бирюзова В.П. и др., 1963; Карупу В.Я.,
1984). Ультратонкі зрізи виготовляли на ультрамікротомі LKB-III,
контраcтували 2%-ним розчином оцтово-кислого уранілацетату в 70є етанолі
(Reynolds G., 1963) і цитратом свинцю (Watson M.L., 1958) по 10 хвилин
та переглядали в електронних мікроскопах ЕМВ-100БР та ЕМ-125К.

Отриманий цифровий матеріал опрацьовували методами варіаційної
статистики з використанням критерію достовірності Ст’юдента (Беленький
М.Л., 1963) та у відповідності до рекомендацій, викладених у посібниках
(Урбах В.Ю., 1964; Лакин Г.Ф., 1973; Мерков А.М. и др., 1974; Минцер
О.П. и др., 1991).

Результати дослідження та їх обговорення. Розроблений нами метод для
оцінки стану сперматогенезу апробований на моделі пошкодження гонад
білих щурів при свинцевій інтоксикації, а також при корекції її люпином.

Нам вдалося відтворити модель пошкодження гонад, встановивши при цьому
грубе порушення процесу цитодиференціації і передчасну зміну
міжклітинних взаємодій між сустентоцитами і сперматидами, які викликають
різке зниження запропонованого нами ПСДС з 0,91±0,02 до 0,64±0,02. Слід
зазначити, що за допомогою ПСДС відмічали погіршення стану
сперматогенезу з таким же високим ступенем достовірності (p0,05

>0,05

Число нормальних сперматогоній M±m

43,92±2,03

44,23±3,11

48,89±2,24

p

>0,05

>0,05

Число канальців з 12-ю стадією мейозу M±m

1,75±0,52

1,13±0,37

2,13±0,51

p

>0,05

>0,05

Число канальців зі злущеними спермато-генними клітинами M±m

1,88±0,43

2,13±0,43

2,25±0,48

p

>0,05

>0,05

ПСДС M±m

0,94±0,02

0,88±0,02

0,86±0,02

p

>0,05

0,05) і на достовірне зниження показника після 4-х місячної
інгаляційної дії смоли (t=2,83; p*h ? 3/4 ue $ @ $ @ N ??????*h ae– ? 3/4 @ @ & @ @ @ @ $ @ ph ????? @ ?????????t?? ????l?????при розробці заходів профілактики захворювань у працюючих з епоксидними сполуками, зокрема, при нормуванні цих хімічних речовин у повітрі робочої зони виробничих приміщень. При дії різноспрямованих гравітаційних навантажень величиною 4g на самців білих щурів спостерігалось пригнічення сперматогенезу, морфологічними проявами якого було зниження числа нормальних сперматогоній на 25% у групі тварин з краніо-каудальним (p0,05) і достовірне зниження показника після
4-х міс. інгаляції (t=2,83; p0,05), та не заважала повноцінному розвитку
потомства, отриманого від спарювання їх з інтактними самицями.

6. Локальне опромінення самиць щурів ЕМП НВЧ на протязі 3-х естральних
циклів до спарювання їх з інтактними самцями не впливало на
антенатальний і ранній постнатальний онтогенез їхнього потомства та не
змінювало морфо-функціональний стан сперматогенезу в потомків чоловічої
статі по досягненні ними статевої зрілості, який характеризували за
допомогою традиційних методів оцінки та розробленого нами методичного
підходу.

7. Опромінення ЕМП НВЧ вагітних самиць як в до-, так і в
постімплантаційний період розвитку зародка не викликало збільшення
антенатальної загибелі та уповільнення загального розвитку плоду, проте
приводило до появи в двомісячних потомків самиць, опромінених в 6-16 дні
вагітності, блокування сперматогенезу в періоді дозрівання, а також
напруження функціональної активності гландулоцитів та сустентоцитів
сім’яників.

У потомків білих щурів чоловічої статі, частина пренатального онтогенезу
яких (1-6 та 6-16 дні) проходила в умовах дії ЕМП НВЧ, виявлені
структурні перебудови в аденогіпофізі та наднирниках, котрі свідчили про
підвищення функціональної активності цих ендокринних органів. Найбільш
виражені ці явища в потомків самиць, опромінених в пізні строки
вагітності. Отримані дані свідчать про те, що застосування в лікувальній
практиці ЕМП НВЧ протипоказано при вагітності.

8. На основі вивчення гонадотропної дії чинників хімічної та фізичної
природи встановлена висока чутливість розробленого методичного підходу в
порівнянні з відомими методами оцінки сперматогенезу, що дає змогу
виявляти мінімальні (порогові) рівні дії пошкоджуючих агентів, при яких
традиційні методи не чутливі. Результати роботи є теоретичною основою
для розробки профілактичних заходів, спрямованих на запобігання
можливого несприятливого впливу хімічних та фізичних чинників на
організм людини.

СПИСОК ОПУБЛІКОВАНИХ ПРАЦЬ ЗА ТЕМОЮ ДИСЕРТАЦІЇ

1. Яценко В.П., Анисимова И.Г., Запривода Л.П. Новый метод
морфометрического исследования закономерностей сперматогенеза // Вісник
морфології. – 1999. – №2. – С. 224-226. (Автором самостійно
проаналізована спеціальна література, вибрані зручні для ідентифікації
стадії сперматогенезу, проведені експеримент, гістологічна обробка
матеріалу, обробка та аналіз отриманих даних і написання роботи).

2. Запривода Л.П. Сравнительная характеристика морфологических методов
оценки гонадотоксического эффекта химических веществ // Вісник
морфології. – 2001. – №1. – С. 53-56.

3. Яценко В.П., Анісімова І.Г., Запривода Л.П. Морфо-функціональний стан
процесів сперматогенезу білих щурів в умовах дії гіпергравітації //
Український медичний альманах. – 2002. – №4. – С. 168-171. (Автором
самостійно проаналізована спеціальна література, проведені експеримент,
гістологічна обробка матеріалу, обробка та аналіз отриманих даних і
написання роботи).

4. Пат. №35451А UA, МПК 6 G01 №33/48. Спосіб оцінки порушень
сперматогенезу / Яценко В.П., Анісімова І.Г., Запривода Л.П.; НМУ імені
О.О. Богомольця. – №99105629; Заявл. 14.10.1999; Опубл. 15.03.2001 //
Промислова власність. – 2001. – №2. – С. 1.105. (Автором самостійно
проаналізована спеціальна література, вибрані зручні для ідентифікації
стадії сперматогенезу, проведені експеримент, гістологічна обробка
матеріалу, аналіз отриманих даних і написання роботи).

5. Яценко В.П., Анисимова И.Г., Запривода Л.П., Блонская Л.Ф.
Экспериментальные исследования влияния микроволн КВЧ диапазона на
генеративную функцию // Тез. докл. 1 Междунар. симпоз. “Гигиена
физических факторов окружающей и производственной среды”. – Киев, 1993.
– С. 55. (Автором проведені експеримент, гістологічна обробка матеріалу,
обробка та аналіз отриманих даних).

6. Яценко В.П., Запривода Л.П., Анісімова І.Г., Андрієнко Т.В., Блонська
Л.Ф. Морфологічні особливості сперматогенезу потомства білих щурів при
дії на вагітних самок міліметрового електромагнітного випромінювання //
Тез. доп. V конгр. патологоанатомів України “Екологічна та інфекційна
патологія: Сучасні патологоанатомічні аспекти”. – Чернігів, 1993. – С.
159. (Автором проведені експеримент, гістологічна обробка матеріалу,
аналіз результатів).

7. Запривода Л.П. Особливості сперматогенезу щурів при дії епоксидної
смоли ЕД-22ф // Наукові записки з питань медицини, біології, хімії,
аграрії та сучасних технологій навчання. Щорічник. Вип. 1. – Київ, 1997.
– Частина I. – С. 213-214.

8. Анисимова И.Г., Яценко В.П., Запривода Л.П. Влияние микроволн крайне
высокой частоты на развитие внутриутробного плода и потомства // Мат.
конф. та тез. доп. “Проблеми екології та медицини”. – 1998. – №3-4. – С.
93-94. (Автором проведені експеримент, гістологічна обробка матеріалу,
обробка та аналіз отриманих даних).

9. Анисимова И.Г., Яценко В.П., Запривода Л.П. Морфологические
особенности сперматогенеза белых крыс при интоксикации свинцом и
коррекции люпином // Фахове видання наук. пр. Національного конгресу
анатомів, гістологів, ембріологів і топографоанатомів України “Актуальні
питання морфології”. – Луганськ, 1998. – С. 14. (Автором проведені
експеримент, гістологічна обробка матеріалу, обробка та аналіз отриманих
даних).

10. Яценко В.П., Запривода Л.П., Рева С.М. Алгоритмічне та програмне
забезпечення досліджень сперматогенезу в токсикологічному експерименті
// Мат. доп. II наук.-практ. конф. “Актуальні проблеми експериментальної
медицини”. – Київ, 1998. – С. 107-108. (Автором проведені експеримент,
гістологічна обробка матеріалу, обробка та аналіз отриманих даних).

11. Анисимова И.Г., Запривода Л.П. Морфо-функциональные исследования
гонадотоксического действия эпоксидной смолы ЭД-22ф // Мат. доп. II
наук.-практ. конф. “Актуальні проблеми експериментальної медицини”. –
Київ, 1998. – С. 73-74. (Автором проведені експеримент, гістологічна
обробка матеріалу, обробка та аналіз отриманих даних і написання
роботи).

12. Запривода Л.П., Яценко В.П., Анисимова И.Г. Функциональные и
морфологические показатели сперматогенеза у белых крыс при воздействии
моделируемой гипергравитации // Мат. доп. III наук.-практ. конф.
“Актуальні проблеми експериментальної медицини”. – Київ, 1999. – С.
41-43. (Автором проведені експеримент, гістологічна обробка матеріалу,
аналіз результатів).

13. Яценко В.П., Анисимова И.Г., Запривода Л.П. Количественные подходы к
оценке влияния гипергравитации на сперматогенез в эксперименте // Мат.
доп. симпозіуму з проблем космічної медицини. – Київ, 2002. – С. 18-20.
(Автором проведені експеримент, гістологічна обробка матеріалу, обробка
та аналіз отриманих даних).

14. Анисимова И.Г., Запривода Л.П. Особенности функции репродукции и
пренатального развития белых крыс при воздействии моделируемых факторов
космического полета // Мат. доп. IV наук.-практ. конф. “Актуальні
проблеми експериментальної медицини”. – Київ, 2002. – С. 26-28.(Автором
проведені експеримент, гістологічна обробка матеріалу, аналіз
результатів).

15. Запривода Л.П., Анисимова И.Г. Изучение функции репродукции
млекопитающих в условиях воздействия измененной гравитации // Мат. XII
конференция по космической биологии и авиакосмической медицине. – М.,
2002. – С. 149-50. (Автором проведені експеримент, гістологічна обробка
матеріалу, обробка та аналіз отриманих даних і написання роботи).

АНОТАЦІЯ

Запривода Л.П. Морфо-функціональна характеристика сперматогенезу при дії
деяких хімічних і фізичних чинників. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за
спеціальністю 14.03.09 – гістологія, цитологія та ембріологія. –
Національний медичний університет імені О.О. Богомольця, Київ, 2005.

Дисертація присвячена вивченню загальних закономірностей перебігу
процесу сперматогенезу в умовах впливу хімічних (летючих компонентів
епоксиднодіанової смоли ЕД-22ф) і фізичних (різноспрямованої
гіпергравітації і локального опромінення електромагнітним полем
надвисокої частоти низької інтенсивності) пошкоджуючих чинників
навколишнього середовища.

Розроблений та апробований на всіх експериментальних моделях
морфометричний метод для оцінки стану сперматогенезу, який на основі
кількісних критеріїв дозволив охарактеризувати початкові порушення цього
процесу, здатні виникати при мінімальних (порогових) рівнях дії чинників
хімічної та фізичної природи.

Отримані дані є теоретичною основою для розробки профілактичних заходів,
спрямованих на запобігання можливого несприятливого впливу хімічних та
фізичних агентів на організм людини.

Ключові слова: сперматогенез, сперматиди, репродуктивні органи,
гонадотоксична дія, епоксиднодіанова смола ЕД-22ф, різноспрямована
гіпергравітація, електромагнітне випромінювання надвисокої частоти.

АННОТАЦИЯ

Запривода Л.П. Морфо-функциональная характеристика сперматогенеза при
действии некоторых химических и физических факторов. – Рукопись.

Диссертация на соискание ученой степени кандидата медицинских наук по
специальности 14.03.09 – гистология, цитология и эмбриология. –
Национальный медицинский университет имени А.А. Богомольца, Киев, 2005.

Диссертация посвящена изучению общих закономерностей протекания процесса
сперматогенеза в условиях влияния химических (летучих компонентов
эпоксиднодиановой смолы ЭД-22ф) и физических (разнонаправленной
гипергравитации и локального облучения электромагнитным полем
сверхвысокой частоты низкой интенсивности) повреждающих факторов
окружающей среды.

Морфо-функциональное состояние сперматогенеза оценивали в соответствии с
существующими методическими документами. Также нами разработан новый
морфометрический метод (определение показателя степени дифференциации
сперматид – ПСДС), который на основе количественных критериев позволил
характеризовать начальные нарушения этого процесса, способные возникать
при минимальных (пороговых) уровнях воздействия факторов химической и
физической природы.

Всего в экспериментах было задействовано 208 самцов белых крыс, изучен
эстральный цикл у 652 самок, получено 256 беременных самок, обследовано
1570 плодов и 588 крысят.

Проведенные исследования указывают, что ингаляционное воздействие
эпоксиднодиановой смолы ЭД-22ф на протяжении 4-х мес. на уровне
существующей ПДК по эпихлоргидрину (0,92±0,07 мг/м3) не изменяло
функциональных и морфологических показателей клеток сперматогенного ряда
(согласно с традиционными методами оценки). Оценка состояния
сперматогенеза разработанным методом указывает на тенденцию к снижению
предложенного нами ПСДС после 2-х мес. и на достоверное снижение
показателя после 4-х мес. ингаляции, что свидетельствует об
избирательном действии смолы на сперматогенез, в частности, на процесс
дифференциации сперматид.

При действии разнонаправленных гравитационных нагрузок величиной 4g (в
кранио-каудальном и каудо-краниальном направлении) на самцов крыс
наблюдали угнетение сперматогенеза в виде нарушения постмейотического
развития сперматозоидов, снижения индекса сперматогенеза и уменьшения
числа сперматогоний в извитых семенных канальцах. Следует отметить, что
угнетение сперматогенеза в семенниках, ухудшение условий для созревания
сперматозоидов в резко уменьшенных в размерах придатках семенников и
снижение секреторной функции семенных пузырьков, более выраженное при
воздействии гипергравитации в каудо-краниальном направлении, вкупе
привели в этой группе животных к уменьшению оплодотворяющей способности
сперматозоидов на 41% (p

Нашли опечатку? Выделите и нажмите CTRL+Enter

Похожие документы
Обсуждение

Оставить комментарий

avatar
  Подписаться  
Уведомление о
Заказать реферат!
UkrReferat.com. Всі права захищені. 2000-2020